Question

【題目】為了調(diào)查銀川市自來水水源地的水質(zhì)情況，某研究小組對該地自來水水樣中的大腸桿菌進行了測定，請回答下列問題：

(1)該小組采用平板劃線法分離提純水樣中的細(xì)菌，劃線時在培養(yǎng)基上共畫了4個區(qū)域，則需要________次灼燒接種環(huán)。在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是________________________________________。

(2)在純化菌種時，所用的培養(yǎng)基都需要在接種前用____________法進行滅菌。將1mL水樣稀釋1000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適宜條件下培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為____________。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種____________作為對照進行實驗。

(3)菌種需臨時保藏時，要先將菌種接種到試管的___________培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管放入_______冰箱中保藏。但此方法存在的缺點是_________________________。

（4）在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在___________中。實驗結(jié)束時，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行__________處理后才能丟棄。

Answer 1

【答案】5 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面高壓蒸汽滅菌法5.0×108等量的無菌水固體斜面4℃保存的時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異恒溫培養(yǎng)箱滅菌

【解析】

本題考查微生物的實驗室培養(yǎng)，需掌握微生物的接種、滅菌、保藏、計數(shù)等相關(guān)知識，需歸納總結(jié)記憶。

（1）采用平板劃線法純化微生物時，每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，劃線結(jié)束后還需灼燒接種環(huán)，若劃線時在培養(yǎng)基上共畫了4個區(qū)域，則需要5次灼燒接種環(huán)；每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，這樣可以將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。

（2）在純化菌種時，所用的培養(yǎng)基都需要在接種前用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；將1mL水樣稀釋1000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適宜條件下培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49。首先求出3個平板的平均菌落數(shù)即(51+50+49)÷3=50，然后利用公式(C/V) ×M，即可得出每升水樣中的活菌數(shù)=（50/0.1）×1000×1000=5.0×108；要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種無菌水作為對照進行實驗，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。

(3)菌種需臨時保藏時，要先將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管放入4℃冰箱中保藏。但此方法存在的缺點是保存的時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。

（4）在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中。實驗結(jié)束時，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后才能丟棄。

燒灼時期	目的
取菌種前	殺死接種環(huán)上原有微生物
每次劃線前	殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留菌種，使下次劃線的菌種直接來自于上次劃線末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少，達(dá)到分離菌株的目的
接種結(jié)束后	殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者