Question

6．在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan^r）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)．如圖為獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程．

請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問(wèn)題．
（1）A過(guò)程需要的酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（2）C過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入卡那霉素．
（3）目的基因的檢測(cè)最關(guān)鍵是看受體細(xì)胞是否含有目的基因，常用的方法為DNA分子雜交技術(shù)，D過(guò)程應(yīng)該用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的抗蟲(chóng)基因作為探針．
（4）圖中是將抗蟲(chóng)基因?qū)�入離體的棉花葉片細(xì)胞再進(jìn)行植物組織培養(yǎng)得到了新植株．另外一種方案也可以將抗蟲(chóng)基因?qū)�入植物的受精卵中，再進(jìn)行培養(yǎng)，導(dǎo)入成功的標(biāo)志是棉花有抗蟲(chóng)性狀的表現(xiàn)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程示意圖，其中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；B表示用選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌的過(guò)程；C表示脫分化過(guò)程；D表示轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株的檢測(cè)．

解答 解：（1）圖中A為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，該過(guò)程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒．
（2）由圖可知，標(biāo)記基因時(shí)卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培養(yǎng)基篩選含有抗蟲(chóng)基因的再生植株．
（3）為確定受體細(xì)胞是否含有目的基因，可利用DNA分子雜交法，用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子水平上的檢測(cè)
（4）圖中是將抗蟲(chóng)基因?qū)�入離體的棉花體細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)；也可以將抗蟲(chóng)基因?qū)�入植物的受精卵�?xì)胞中，讓其直接發(fā)育成新個(gè)體．可在個(gè)體水平上鑒定，即讓棉鈴蟲(chóng)采食棉花葉片觀察存活情況．如果棉鈴蟲(chóng)采食棉花葉片后存活，說(shuō)明失敗，如果死，說(shuō)明成功．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶     DNA連接酶
（2）卡那霉素
（3）DNA分子雜交技術(shù)       放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的抗蟲(chóng)基因
（4）植物組織培養(yǎng)      受精卵　   棉花有抗蟲(chóng)性狀的表現(xiàn)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株的培育過(guò)程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱(chēng)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息答題．