Question

5．塑料袋造成的“白色污染”早已成為地球公害，塑料袋的自然分解需要20-1000年不等．2008年7月3日加拿大媒體報道：16歲的高中生丹尼爾-伯德從土壤中找到了一類假單胞桿菌，能將聚乙烯塑料的自然降解過程縮短至3個月，而且分解產(chǎn)物只有水和二氧化碳．伯德也因此被譽(yù)為“塑料袋的克星”．以下是伯德尋找到聚乙烯降解菌的大致過程．
請回答：

（l）根據(jù)你的生活經(jīng)驗推測，伯德這項研究的“土壤樣品”最可能取自于垃圾場．
（2）圖中“…”表示對土壤懸浮液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞．從而能在Ⅰ號培養(yǎng)基表面形成單個菌落．
（3）I號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”．如圖采用的接種方法為稀釋涂布平板法．使用Ⅱ號培養(yǎng)基的目的是使目的菌數(shù)目增多，培養(yǎng)基中必須包含水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等基本營養(yǎng)成分．從物理性質(zhì)來看，Ⅱ號培養(yǎng)基中不能添加凝固劑或瓊脂．
（4）若要進(jìn)行月季花藥的離體培養(yǎng)，最好選擇單核期的花藥，從宏觀來判斷通常擇完全未開放的蓓蕾，采用的MS固體培養(yǎng)基中除含有多種大量元素和微量元素外，還需添加植物激素，其中主要是生長素和細(xì)胞分裂素．
（5）為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基在接種前和完成實驗后都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌．
（6）接種時要在酒精燈火焰旁操作．

Answer 1

分析 1、無菌操作技術(shù)有消毒和滅菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學(xué)藥劑消毒法，滅菌有灼燒滅菌法適用于接種工具、干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具、高壓蒸汽滅菌法適用于培養(yǎng)基及容器的滅菌．
2、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落．
稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細(xì)胞．計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個細(xì)胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．
3、植物組織培養(yǎng)是指利用特定的培養(yǎng)將離體的植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)成完整植株的過程．花藥的離體培養(yǎng)、基因工程中的受體細(xì)胞的培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交后雜種細(xì)胞的培養(yǎng)以及植物的大量快速繁殖都要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)．一般順序為：制備培養(yǎng)基→消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培．

解答 解：（1）塑料袋造成的“白色污染”早已成為地球公害，根據(jù)生活經(jīng)驗可知這項研究的“土壤樣品”最可能取自于垃圾場．
（2）圖中“…”表示對土壤懸浮液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞．從而能在Ⅰ號培養(yǎng)基表面形成單個菌落．
（3）I號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，其作用是使目的菌能篩選出來，圖示采用的接種方法為稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基中必須包含水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等基本營養(yǎng)成分．從物理性質(zhì)來看，Ⅱ號培養(yǎng)基中不能添加凝固劑或瓊脂．
（4）一般來說，在單核時期細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高，若要進(jìn)行月季花藥的離體培養(yǎng)，最好選擇單核期的花藥，從宏觀來判斷通常選擇完全未開放的蓓蕾，采用的MS固體培養(yǎng)基中除含有多種大量元素和微量元素外，還需添加植物激素，其中主要是生長素和細(xì)胞分裂素．
（5）微生物實驗室培養(yǎng)的關(guān)鍵就在于避免雜菌污染，培養(yǎng)基在接種前和完成實驗后都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌．
（6）接種時要在酒精燈火焰旁進(jìn)行．
故答案為：
（1）垃圾場
（2）梯度稀釋  菌落
（3）選擇  稀釋涂布平板法   碳源和氮源   凝固劑或瓊脂
（4）單核   完全未開放的蓓蕾   生長素和細(xì)胞分裂素
（5）高壓蒸汽滅菌  
（6）酒精燈火焰旁

點評 微生物這部分內(nèi)容是高考試題的一個熱點，一般體現(xiàn)在對生物工程中的應(yīng)用，考察的知識點有微生物的無菌操作、微生物的分離以及產(chǎn)品的提取，注意總結(jié)．