Question

20．預(yù)防乙肝最有效的途徑是接種疫苗．將乙肝表面抗原基因轉(zhuǎn)移到植物細胞內(nèi)可生產(chǎn)乙肝疫苗．回答下列問題．
（1）欲在短時間內(nèi)大量擴增乙肝表面抗原基因．通過多聚酶鏈式反應(yīng)（填寫中文名稱）技術(shù)，其原理是DNA雙鏈復(fù)制，利用該技術(shù)擴增乙肝表面抗原基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列．
（2）將目的基因?qū)�入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，此外采用花粉管通道法十分簡便經(jīng)濟．用抗原--抗體雜交技術(shù)檢測植物細胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．
（3）將乙肝表面抗原基因?qū)�入植物細胞后，采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得愈傷組織，該技術(shù)需在無菌和人工控制條件下進行．
（4）乙肝疫苗在2～8℃條件下保存，其不宜在常溫下保存最可能的原因乙肝疫苗的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在常溫下保存易變性失活．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）PCR技術(shù)（多聚酶鏈式反應(yīng)）可在段時間內(nèi)大量擴增目的基因，其原理是DNA雙鏈復(fù)制；利用PCR技術(shù)擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列．
（2）將目的基因?qū)�入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，此外還有花粉管通道法和基因槍法，其中花粉管通道法十分簡便經(jīng)濟．用抗原--抗體雜交技術(shù)檢測植物細胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．
（3）將轉(zhuǎn)基因細胞培育常轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)需在 無菌和人工控制條件下進行．
（4）乙肝疫苗的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在常溫下保存易變性失活，因此乙肝疫苗在2～8℃條件下保存，不宜在常溫下保存．
故答案為：
（1）多聚酶鏈式反應(yīng)    DNA雙鏈復(fù)制     要有一段已知目的基因的核苷酸序列
（2）花粉管通道      雜交帶
（3）植物組織培養(yǎng)        無菌和人工控制
（4）乙肝疫苗的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在常溫下保存易變性失活

點評 本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題．