Question

【題目】熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中某種DNA含量。其原理是：在PCR反應(yīng)體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接受到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A.引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則

B.Taq酶可以催化子鏈沿著5'→3'方向延伸，需dNTP作為原料

C.反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)

D.若用cDNA作模板，上述技術(shù)也可檢測(cè)某基因的轉(zhuǎn)錄水平

Answer 1

【答案】D

【解析】

PCR技術(shù)：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

（2）原理：DNA復(fù)制。

（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

A、引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，A正確；

B、根據(jù)圖示中引物延伸的方向可以確定，Taq酶只能從引物的3’端延伸子鏈，催化子鏈沿著5’→3’方向延伸，需dNTP作為原料，B正確；

C、題干中提出“加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針”，并且“每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成”，因此反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)，C正確；

D、若用cDNA作模板，需要檢測(cè)出總mRNA數(shù)目和某基因的mRNA數(shù)目，才能計(jì)算某基因的轉(zhuǎn)錄水平，D錯(cuò)誤。

故選D。