Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答與果酒的制作有關(guān)的問題：

（1）洗凈的紫葡萄用高錳酸鉀溶液浸泡，目的是________。干酵母加入發(fā)酵瓶前要活化處理，目的是________。

（2）加入菌種后，若發(fā)酵瓶初期出現(xiàn)負(fù)壓，主要是因為微生物進(jìn)行______消耗了O2。發(fā)酵后期，產(chǎn)生氣泡的速率變慢的主要原因是________，導(dǎo)致酵母菌活性減弱。

（3）用不同菌種釀制的果酒風(fēng)味不同。從野生的葡萄果皮取樣，經(jīng)適當(dāng)稀釋和_______分離等，獲得酵母菌單菌落，再經(jīng)_______后用于釀酒試驗。

（4）工廠化生產(chǎn)果酒過程中要對發(fā)酵液定期檢測，以掌握發(fā)酵進(jìn)程，檢測參數(shù)包括______和______等。

（二）某病毒是一種單鏈RNA病毒。通過現(xiàn)代生物技術(shù)，可研制該病毒疫苗。回答下列問題：

（1）通過基因工程研制基因重組疫苗。

①若病毒序列已知，可用________法合成目的基因；若病毒序列未知，可先利用病毒核酸樣品，在________酶的催化下合成相應(yīng)的DNA，再建立包括目的基因在內(nèi)的________，進(jìn)而從中獲取目的基因。

②將目的基因?qū)�入大腸桿菌，經(jīng)篩選、純化，接種到_______培養(yǎng)基中培養(yǎng)，提取獲得疫苗；也可將目的基因?qū)�入植物愈傷組織，獲得含有目的基因的胚性細(xì)胞，經(jīng)組培獲得______，最后再生出完整的可食疫苗植株。

（2）通過細(xì)胞工程研制疫苗。

①利用病毒感染Vero-E6細(xì)胞株，由Vero-E6細(xì)胞來生產(chǎn)疫苗。利用細(xì)胞株作為受體細(xì)胞是因為同一細(xì)胞株的細(xì)胞具有相同的_______，從而保證較高的感染率，提高疫苗的單位產(chǎn)量；Vero-E6細(xì)胞株可連續(xù)傳代培養(yǎng)，從中獲得的病毒經(jīng)_______后用于臨床試驗。

②利用病毒免疫過的動物的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)篩選、克隆等途徑獲得單克隆抗體。該單抗作為________用于病毒檢測試劑盒。

Answer 1

【答案】去除雜菌 加快酵母繁殖 需氧呼吸 營養(yǎng)物質(zhì)減少、酒精濃度過高 涂布或劃線 擴大培養(yǎng) 酒精濃度 pH 化學(xué)合成 逆轉(zhuǎn)錄 基因文庫 LB液體 胚狀體 病毒敏感性 滅活 探針

【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：；

（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：

當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿帷?/span>

3、目的基因的獲取方法：

原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成，工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法；PCR技術(shù)擴增目的基因。

4、單克隆抗體的應(yīng)用：

（1）作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點；

（2）用于治療疾病和運載藥物。

（1）洗凈的紫葡萄用高錳酸鉀溶液浸泡，目的是去除雜菌；干酵母加入發(fā)酵瓶前要活化處理，目的是加快酵母繁殖。

（2）在發(fā)酵初期，微生物進(jìn)行需氧呼吸消耗了O2，所以會出現(xiàn)負(fù)壓；發(fā)酵后期，由于營養(yǎng)物質(zhì)較少，酒精濃度過高，抑制酵母菌的發(fā)酵，酵母菌活性減弱，所以產(chǎn)生氣泡的速率變慢。

（3）獲得酵母菌單菌落可以采用稀釋涂布平板法或平板劃線法，從野生的葡萄果皮取樣，經(jīng)適當(dāng)稀釋和涂布或劃線；獲得單菌落，再經(jīng)過擴大培養(yǎng)后，用于釀酒實驗。

（4）檢測酒精發(fā)酵可以通過對培養(yǎng)液的酒精濃度和pH進(jìn)行檢測。

（二）（1）①若病毒序列已知，可以用化學(xué)合成法合成目的基因；由于該病毒是RNA病毒，所以可以用逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成DNA，再建立基因文庫。

②為了獲得盡可能多的疫苗，需要將大腸桿菌進(jìn)行大量培養(yǎng)，因此經(jīng)篩選、純化的大腸桿菌接種到液體LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)；或者目的基因?qū)�入植物愈傷組織，獲得含有目的基因的胚性細(xì)胞，經(jīng)組培獲得胚狀體，最后再生出完整的可食疫苗植株。

（2）①原代培養(yǎng)細(xì)胞傳至10代左右就不容易傳下去，細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞能存活傳到40～50代，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞株，所以同一細(xì)胞株具有相同的病毒敏感性；病毒經(jīng)過滅活后形成疫苗可用于臨床試驗。

②單克隆抗體可以特異性的和相應(yīng)的抗原結(jié)合，所以單抗可以作為探針用于病毒檢測試劑盒。