（09江蘇卷）32．（8分）動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。

（1）肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞                 。

（2）氣室中充入5％C0₂：氣體的主要作用是          。

（3）培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長，但要注意選擇抗生素的             ，以保證抗生素對肝臟無害。

（4）有機(jī)物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機(jī)物X是否具有解毒作用。

材料用具：

    肝臟小塊，外周血淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細(xì)胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機(jī)物X溶液等。實(shí)驗(yàn)過程：

①在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，取4等份，備用。

②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）。

上表中還需進(jìn)行的操作是                           。   

③培養(yǎng)一段時(shí)間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。

④一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察          ，并對比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細(xì)胞正常，則說明                    。

（09四川卷）30.（22分）回答下列Ⅰ、Ⅱ兩個(gè)小題。

Ⅰ.將小鼠胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成一種特定的細(xì)胞（命名為M細(xì)胞），再將M細(xì)胞移植到糖尿病模型小鼠（胰島細(xì)胞被特定藥物破壞的小鼠）體內(nèi)，然后小鼠的血糖濃度，結(jié)果如圖所示（虛線表示正常小鼠的血糖濃度值）。請回答相關(guān)問題：（1）實(shí)驗(yàn)用的胚胎干細(xì)胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用　　　　　酶將其分散成單個(gè)細(xì)胞。

（2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以判定M細(xì)胞已具有　　　　　　細(xì)胞的功能。說明判定的理由　　　　。

（3）用胰島素基因片段做探針，對小鼠胚胎干細(xì)胞和M細(xì)胞進(jìn)行檢測。請?jiān)谙卤淼目崭裰刑钌蠙z測結(jié)果（用“+”表示能檢測到，用“-”表示不能檢測到）。

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，胚胎干細(xì)胞通過　　　　　　　　定向分化為M細(xì)胞。

（4）若將M細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，重組細(xì)胞能否分化為其他類型細(xì)胞？

　　　　，請說明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（09山東卷）35.（8分）（生物一現(xiàn)代生物科技專題）

     人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：

請回答：

（1）過程①代表的是         。

（2）過程②構(gòu)建A基因表過載體時(shí)，必須使用           和

          兩種工具酶。

（4）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，

可選用圖中基因工程生產(chǎn)的          所制備的疫苗。

對該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，

與已知病毒進(jìn)行       比較；或用圖中的           進(jìn)行特異性結(jié)合檢測。

（09浙江卷）1．用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是

A．都需用培養(yǎng)箱                    B．都須用液體培養(yǎng)基

C．都要在無菌條件下進(jìn)行                 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性

（09全國卷Ⅰ）4．下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交或植物細(xì)胞質(zhì)遺傳的敘述，錯(cuò)誤的是

A．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)緣雜種

B．不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細(xì)胞雜交過程

C．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F₁的表現(xiàn)型一致

D．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)₁的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的

（09上海卷）37.（9分）人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P⁵³基因，生物技術(shù)可對此類基因的變化進(jìn)行檢測。

（1）目的基因的獲取方法通常包括________和________。

（2）上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P⁵³基因的部分區(qū)域。與正常人相比，患者在該區(qū)域的堿基會(huì)發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改編的堿基對，這種變異被稱為________。

（3）已知限制酶E識(shí)別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分區(qū)域（見上圖），那么正常人的會(huì)被切成________個(gè)片段，而患者的則被切割成長度為________對堿基和________對堿基的兩種片段。

（4）如果某人的P⁵³基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是________（以P⁺表示正�；�因，Pⁿ表示異�；�因）。

（09江蘇卷）34．（7分）蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖（為抗氨芐青霉素基因），據(jù)圖回答下列問題。

（1）將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有          種DNA片段。

（2）圖中②表示 HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得      種重組質(zhì)粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得          種重組質(zhì)粒。    

（3）目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的              。

（4）圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導(dǎo)人植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中             對T—DNA的降解。

（5）已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險(xiǎn)相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞                            。 

（6）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的

                基因頻率的增長速率。

（09重慶卷）31.（16分）小鼠基因敲除技術(shù)獲得2007年諾貝爾獎(jiǎng)，該技術(shù)采用基因工程、細(xì)胞工程、雜交等手段使小鼠體內(nèi)的某一基因失去功能，以研究基因在生物個(gè)體發(fā)育和病理過程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正�；�因B，使BB細(xì)胞改變?yōu)锽b細(xì)胞，最終培育成為基因敲除小鼠。

（1）基因敲除過程中外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可利用重組質(zhì)粒上的            檢測。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，則可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的                 被激活，使小鼠細(xì)胞發(fā)生癌變。

（2）通過基因敲除，得到一只AABb小鼠。假設(shè)棕毛基因A、白毛基因a、褐齒基因B和黃齒基因b均位于常染色體上，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠，用來與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是             ，雜交子代的基因型是        。讓F₁代中雙雜合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中帶有b基因個(gè)體的概率是                      。不帶B基因個(gè)體的概率是                   。

（3）在上述F₁代中只考慮齒色這對性狀，假設(shè)這對性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則表現(xiàn)黃齒個(gè)體的性別是           ，這一代中具有這種性別的個(gè)體基因是           。

（09福建卷）32.（10分）

    轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請回答：

（1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶       ，對       進(jìn)行切割。

（2）培養(yǎng)板中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有         ，作為標(biāo)記基因。

（3）香蕉組織細(xì)胞具有               ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的         。

（09天津卷）8．（30分）水稻種子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時(shí)，排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。

（1）磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列_____________分子或結(jié)構(gòu)中（多選）。

A.核糖             B.ATP               C.核糖體                D.核膜

（2）種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類關(guān)系是_____________。

（3）植酸酶可降解植酸，在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的_____________  利用率。

（4）酵母菌中植酸的活性較高。下圖是從不同類型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程。

據(jù)圖回答：

①植酸酶________________（Ⅰ/Ⅱ）屬于分泌蛋白。

②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在______________________。

③提純的植酸酶需做活性條件測定。右圖為測定結(jié)果。

圖中的自變量可為____________________________(答一種)；

因變量可以通過測定______________________來表示。

（5）為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)�入水稻，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。

據(jù)圖回答：

①圖中基因組文庫____________（小于/等于/大于）cDNA文庫。

②B過程需要的酶是______________；A、C過程中_____________（可以/不可以）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。

③目的基因Ⅰ和Ⅱ除從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中___________。和_____________為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，該過程中所用酶的顯著特點(diǎn)是_________________________。

（6）已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過程。圖中兩對相對性形狀分別由兩對基因控制，并獨(dú)立遺傳。

    采用上圖育種過程，需從_______________代開始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是______________。選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品性。