Question

14．為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注．我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系．

（1）如圖甲，獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的a（填“a”或“b”）處，DNA連接酶作用于a（填“a”或“b”）處．
（2）將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法（花粉管通道法）法．
（3）由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用技術(shù)，該技術(shù)的核心是脫分化和．
（4）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用一定濃度鹽水澆灌（移植到鹽堿地中）方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性．
（5）如圖乙是該耐鹽基因表達(dá)過程中的一個階段，圖中3和4的核苷酸相同否？說明理由不同，3是核糖核苷酸，4是脫氧核糖核苷酸．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：a處為磷酸二酯鍵，b處為氫鍵，限制酶的原理是作用在磷酸二酯鍵上，而不是氫鍵，在把表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞時，對于動物、植物、細(xì)菌是不一樣的這里要區(qū)分清楚，最后一步在鑒定時可以用DNA分子雜交法，抗原抗體雜交法，還有特性驗證試驗法．最簡單的就是移植到鹽堿地中看是否具有抗性．

解答 解：（1）圖中a表示磷酸二酯鍵，是限制酶的切割位點，也是DNA連接酶的連接位點；b表示氫鍵，是解旋酶的作用位點．
（2）將重組DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法或花粉管通道法．
（3）將細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的主要步驟是脫分化和再分化，原理是植物細(xì)胞具有全能性．
（4）要確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，從分子水平上，需要用放射性同位素標(biāo)記的目的基因做探針進(jìn)行分子雜交檢測；從個體水平上，又要用一定濃度的鹽水澆灌方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性．
（5）乙圖表示以DNA的一條鏈為模板合成mRNA的過程，即轉(zhuǎn)錄過程，其中3是胞嘧啶核糖核苷酸，4是胞嘧啶脫氧核苷酸．
故答案為：
（1）a  a
（2）基因槍法（花粉管通道法）
（3）植物組織培養(yǎng)     脫分化（去分化）再分化
（4）耐鹽基因（目的基因） 一定濃度鹽水澆灌 （移植到鹽堿地中）
（5）不同，3是核糖核苷酸，4是脫氧核糖核苷酸．

點評 本題考查基因工程和植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力，難度不大．