【題目】為了從動(dòng)物組織中提取純凈的DNA,首先要快速、有效地消化裂解動(dòng)物組織細(xì)胞。消化裂解動(dòng)物組織常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性劑處理、變性劑處理等。某科研人員擬使用加酶洗衣粉消化裂解豬肌肉樣本,并提取豬的DNA。實(shí)驗(yàn)步驟如下:
①取500mg剪碎的豬肌肉組織于離心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超純水混合,在一定溫度條件下水浴消化24h;
②加入苯酚、氯仿、異丙醇(25:24:1)混合液使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì);
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴1h;
④加醋酸鈉和無水乙醇,高速離心15min;
⑤用70%乙醇洗滌沉淀兩次,風(fēng)干,得到高純度的DNA。
請回答有關(guān)問題:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解動(dòng)物組織細(xì)胞的原理是 。
(2)步驟③的目的是 ,步驟④中使用無水乙醇的目的是 。
(3)將提取到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后,與 試劑共熱,冷卻后可觀察到溶液呈藍(lán)色。
(4)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)前將新鮮的豬肌肉組織置于液氮冷藏,與室溫下放置相同時(shí)間的等量豬肌肉組織相比,提取到的DNA含量較多,最可能的原因是 。
(5)如果要將加酶洗衣粉法提取DNA與蛋白酶K法提取DNA的效果進(jìn)行對比,請簡要說明實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
思路 。
【答案】
(1)加酶洗衣粉中的蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細(xì)胞膜
(2)水解RNA,去除雜質(zhì) 析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA
(3)二苯胺
(4)低溫抑制了DNA酶的活動(dòng),減少DNA降解
(5)將加酶洗衣粉換成蛋白酶K,重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步驟,得到DNA后,測定DNA的量和純度,并與加酶洗衣粉組比較。
【解析】
(1)細(xì)胞膜被破壞可導(dǎo)致細(xì)胞裂解,由于細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì),所以蛋白酶可以促進(jìn)細(xì)胞裂解,另外表面活性劑等可以破壞細(xì)胞膜。
(2)苯酚、氯仿、異丙醇混合液,可以促進(jìn)蛋白質(zhì)變性;RNA水解酶可以水解RNA,說明酶的專一性。
(3)無水乙醇可以析出DNA,提取含雜質(zhì)較少DNA,高速離心時(shí)溫度保持在4℃,原因有降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出。
(4)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證蛋白酶K法提取DNA的效果,因此將上述實(shí)驗(yàn)中的加酶洗衣粉換成蛋白酶K,其他實(shí)驗(yàn)步驟相同,得到DNA后,測定DNA的量和純度。
年級(jí) | 高中課程 | 年級(jí) | 初中課程 |
高一 | 高一免費(fèi)課程推薦! | 初一 | 初一免費(fèi)課程推薦! |
高二 | 高二免費(fèi)課程推薦! | 初二 | 初二免費(fèi)課程推薦! |
高三 | 高三免費(fèi)課程推薦! | 初三 | 初三免費(fèi)課程推薦! |
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】某校高中生物研究性學(xué)習(xí)小組的同學(xué)打算選擇合適材料做“生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定"實(shí)驗(yàn),根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。請根據(jù)下表所列各種材料回答問題:
各種可供實(shí)驗(yàn)的材料 | |||||
梨 | 西瓜 | 甘蔗 | 黃豆 | 花生種子 | 小麥種子 |
(1)材料中適合于鑒定還原糖的是 _______ ,需要的實(shí)驗(yàn)條件是______ ,最終溶液出現(xiàn)__________。最適合用來鑒定脂肪的材料是__________。
(2)鑒定細(xì)胞中脂肪常選用的試劑是 ____________。
(3)蛋白質(zhì)與_______試劑發(fā)生反應(yīng),該試劑需要先加A液后加B液,并且A液_______ (多/少)B液_____(多/少),最終溶呈現(xiàn)______色。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】某地區(qū)農(nóng)田棄耕一年后雜草叢生,現(xiàn)已演替至灌木階段。假設(shè)外界條件基本不變,且無人為無擾,將來有可能演替至森林階段。下列分析錯(cuò)誤的是
A. 灌木階段找不到生活在草本植物階段的植物種類
B. 在演替過程中,群落的垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)都發(fā)生變化
C. 演替過程中,物種豐富度增加,恢復(fù)力穩(wěn)定性降低
D. 草本植物階段演替至灌木階段,食物鏈往疰會(huì)發(fā)生變化
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】每年的冬季,流感疫情都會(huì)進(jìn)入一個(gè)流行期。但由于人們接種了甲流疫苗后,甲型H7N9病毒不再是最占上風(fēng)的毒株了。請分析回答問題:
(1)病毒是非細(xì)胞形態(tài)的生命體,它的主要生命活動(dòng)必須在細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)。病毒與細(xì)胞在起源上的關(guān)系是人們很感興趣的問題,目前主要存在兩種觀點(diǎn):①生物大分子→病毒→細(xì)胞;②生物大分子→細(xì)胞→病毒。
根據(jù)上述資料并結(jié)合所學(xué)的相關(guān)知識(shí)分析,你支持第________種觀點(diǎn),其依據(jù)是:_______
(2)細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖,青霉素抑制肽聚糖的合成,從而起到抑制細(xì)菌生長的作用。艾滋病病人能否通過注射青霉素抑制病毒的增殖? _______ ,為什么?_____
(3)據(jù)說H7N9流感康復(fù)者血清能治療H7N9流感。下面是通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證的過程,請完善實(shí)驗(yàn)步驟并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模候?yàn)證H7N9流感康復(fù)者的血清能治療H7N9流感。
實(shí)驗(yàn)材料:健康小白鼠、H7N9病毒液、未患過H7N9流感的小白鼠血清A(簡稱血清A)、患H7N9流感后康復(fù)的小白鼠血清B(簡稱血清B)等。
實(shí)驗(yàn)步驟:
①取年齡、體重、性別、身體狀況相同的若干健康小白鼠,平均分為兩組,標(biāo)記為甲、乙。
②給甲、乙兩組小白鼠同時(shí)注射,使其患H7N9流感。
③給甲、乙兩組小白鼠分別注射。
④一段時(shí)間后。
預(yù)測結(jié)果:______________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】植酸是常見的抗?fàn)I養(yǎng)因子,能阻止某些養(yǎng)分被利用?茖W(xué)家將能降低植酸的植酸酶基因轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞中,獲得轉(zhuǎn)基因玉米。請回答下列問題:
(1)若要獲得植酸酶基因可以以植酸酶酶mRNA為模板,通過__________過程合成植酸酶基因。常用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,該方法依據(jù)的原理是____________________。
(2)構(gòu)建的植酸酶基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、目的基因、________和標(biāo)記基因,其中啟動(dòng)子是___________識(shí)別并結(jié)合的部位,標(biāo)記基因的作用是______________________。
(3)將目的基因?qū)胗衩准?xì)胞常用的方法是_________________,欲檢測是否表達(dá)出植酸酶,應(yīng)采用的方法是______________________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他哺乳動(dòng)物的血液來提取和分離血紅蛋白,請回答下列有關(guān)問題:
(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,經(jīng)處理并離心,收集血紅蛋白溶液。
①加入檸檬酸鈉的目的是________。
②以上所述的過程為樣品處理,它包括________、________、分離血紅蛋白溶液。
(2)收集的血紅蛋白溶液可以在透析袋中透析,這就是樣品的粗分離。
①透析的目的是______________。
②透析過程中需要用到________緩沖液。
(3)通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。
①凝膠色譜法是根據(jù)________分離蛋白質(zhì)的方法。
②加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率完全取決于___________________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】用碘液、蘇丹III染液和雙縮脲試劑測得甲、乙、丙三種植物的干種子中三大類有機(jī)物顏色反應(yīng)如下表,其中“+”的數(shù)量代表顏色深淺程度,下列有關(guān)說法正確的是
試劑種類 | 碘液 | 蘇丹Ⅲ染液 | 雙縮脲試劑 |
甲 | + + + + | + + | + |
乙 | + + | + + + + | + + |
丙 | + | + + | + + + + |
A. 乙種子中主要含蛋白質(zhì)
B. 蘇丹Ⅲ染液和雙縮脲試劑與相應(yīng)的物質(zhì)發(fā)生的顏色反應(yīng)分別是紅色和紫色
C. 在觀察顏色時(shí)都不需要用光學(xué)顯微鏡
D. 這三種試劑使用均不需要水浴加熱
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】(18分)高度分化的動(dòng)物細(xì)胞分化潛能變窄,它的全能性受到限制,但它的細(xì)胞核仍具有全能性。請用性成熟的青蛙作實(shí)驗(yàn)材料,設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案證明上述說法。
(1)實(shí)驗(yàn)的大體思路是:_________________________________________________。
(2)根據(jù)上述思路設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)步驟如下:
第一步,取正常的雄性青蛙的體細(xì)胞直接進(jìn)行組織培養(yǎng),觀察能否形成完整的青蛙。
第二步,準(zhǔn)備若干個(gè)正常雄性青蛙的體細(xì)胞和雌性青蛙的卵細(xì)胞。
第三步,_______________________________________________________________。
第四步,將第三步形成的重組細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)克隆,觀察能否形成完整的青蛙。
(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析:_________________________________________。
(4)問題討論:第四步若能克隆出小型青蛙,其性別應(yīng)為________,主要性狀應(yīng)與________相同;上述實(shí)驗(yàn)?zāi)芊裾f明細(xì)胞的分化受細(xì)胞質(zhì)的影響?________________________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】英國純血馬是世界頂級(jí)馬術(shù)比賽的常用馬種,其數(shù)量少,生育力低。現(xiàn)代生物工程能有效提高優(yōu)質(zhì)馬的生育效率。請回答:
(1)用__________________激素處理適齡純血母馬,使其一次性排出比自然情況下多幾倍到幾十倍的卵子。采集的卵母細(xì)胞人工培育至減數(shù)第二次分裂的中期,該時(shí)期在顯微鏡下可觀察到次級(jí)卵母細(xì)胞和 ________________。
(2)體外受精前要對精子進(jìn)行一定的處理,使其_________。
(3)為取得同卵雙胎或多胎,可以在胚胎發(fā)育的_______________期用機(jī)械方法將胚胎分割。
(4)隨著動(dòng)物克隆技術(shù)的發(fā)展,人們可以將純血馬的_____________移人其他馬的____________細(xì)胞中,將其激活并發(fā)育成胚胎,植入代孕母馬體內(nèi)。為保證胚胎移植的成功,胚胎的供體和受體應(yīng)保持_________________________________。
(5)克隆技術(shù)在帶來巨大社會(huì)效益的和經(jīng)濟(jì)效益的同時(shí),也對人們的傳統(tǒng)觀念造成極大沖擊,我國政府的態(tài)度是禁止_______________性克隆。
查看答案和解析>>
湖北省互聯(lián)網(wǎng)違法和不良信息舉報(bào)平臺(tái) | 網(wǎng)上有害信息舉報(bào)專區(qū) | 電信詐騙舉報(bào)專區(qū) | 涉歷史虛無主義有害信息舉報(bào)專區(qū) | 涉企侵權(quán)舉報(bào)專區(qū)
違法和不良信息舉報(bào)電話:027-86699610 舉報(bào)郵箱:58377363@163.com