Question

【題目】微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列。由于重復(fù)單位和重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性，因此微衛(wèi)星DNA可以作為分子標(biāo)記，并有著廣泛應(yīng)用。

（1）可以用標(biāo)記的__________________為探針，與基因組文庫進(jìn)行雜交篩選，然后再經(jīng)多個(gè)步驟獲取微衛(wèi)星DNA。

（2）擴(kuò)增微衛(wèi)星DNA序列A7I0的PCR反應(yīng)體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及耐熱的DNA聚合酶。其中dNTP的作用是_____________________________； PCR技術(shù)護(hù)增目的基因的前提是_________________________，以便根據(jù)這一序列合成引物，所以引物應(yīng)選用下圖中的_________（填圖中標(biāo)號(hào)）。PCR的基本反應(yīng)步驟為__________________________，其產(chǎn)物以_______________形式擴(kuò)增。

（3）根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點(diǎn)判斷，應(yīng)用這種標(biāo)記可進(jìn)行的研究有________（填字母）。

①人類親子鑒定 ②調(diào)查某地大熊貓種群數(shù)量

③誘導(dǎo)基因突變 ④冠狀病毒遺傳物質(zhì)測序

A．①② B．②③ C．③④ D．①④

Answer 1

【答案】微衛(wèi)星DNA（重復(fù)序列） 合成DNA的原料、提供能量 有一段已知目的基因的核苷酸序列 Ⅰ和Ⅳ DNA解鏈-引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈-互補(bǔ)鏈的合成（變性、復(fù)性/退火、延伸） 約為2n（指數(shù)） A

【解析】

PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三步。在循環(huán)之前，常需要進(jìn)行一次預(yù)變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。

PCR過程為:

變性，當(dāng)溫度上升到90 ℃以上時(shí)，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。

復(fù)性，當(dāng)溫度降低到50℃左右是，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。

延伸，溫度上升到72 ℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。

（1）由于微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列，而且在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性，因此可以用標(biāo)記的微衛(wèi)星DNA（重復(fù)序列）為探針，與基因組文庫進(jìn)行雜交篩選，然后再經(jīng)多個(gè)步驟獲取微衛(wèi)星DNA。

（2）PCR反應(yīng)體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及耐熱的DNA聚合酶。其中緩沖液模擬的是細(xì)胞中DNA復(fù)制的環(huán)境，dNTP是合成DNA的原料、并能提供能量，引物為子鏈的合成提供起始點(diǎn)，DNA聚合酶催化DNA的復(fù)制過程； PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的首要條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，引物能夠與模板DNA鏈進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，而后在DNA聚合酶的作用下，單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3’端，所以引物應(yīng)選用下圖中的Ⅰ和Ⅳ（填圖中標(biāo)號(hào)）。PCR的步驟包括DNA解鏈（高溫變性）--引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈（低溫復(fù)性）-互補(bǔ)鏈的合成（中溫延伸），其產(chǎn)物大約以2n（指數(shù)）形式擴(kuò)增。

（3）由于微衛(wèi)星DNA在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性”因此應(yīng)用這種標(biāo)記可進(jìn)行的研究有：

①由于微衛(wèi)星DNA在個(gè)體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性，因此可以用于人類親子鑒定 ，① 正確

②可利用微衛(wèi)星DNA的特性進(jìn)行某地大熊貓種群數(shù)量的調(diào)查，②正確；

③誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素，與微衛(wèi)星DNA的特性聯(lián)系不起來，③錯(cuò)誤；

④冠狀病毒遺傳物質(zhì)是RNA，其測序過程與微衛(wèi)星DNA無關(guān)，④錯(cuò)誤；即①②正確。

故選A。