Question

【題目】某種產(chǎn)脂肪酶菌常被用作飼料添加劑，下表是從土壤中初篩該菌的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)回答下列問題：

（NH4）2SO4	NaCl	MgSO4·7H2O	K2HPO4	1％橄欖油	蒸餾水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4mL	定容至 100mL	7.0

（1）在上述培養(yǎng)基中，橄欖油能為產(chǎn)脂肪酶菌提供_________。用該培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的目的是_____。在選擇培養(yǎng)過程中，使用搖床振蕩效果較好，原因是_____________。

（2）分離產(chǎn)脂肪酶菌時(shí)，在上述培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，還應(yīng)加入瓊脂和溴甲酚紫（堿性條件下呈紫色，在酸性條件下為黃色）。在平板上產(chǎn)脂肪酶菌菌落的周圍會(huì)出現(xiàn)黃色圈，原理是_________。篩選時(shí)常選擇黃色圈直徑大的菌落，說明_____。

（3）可用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算得出菌體數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低，原因是_________。使用該方法計(jì)數(shù)時(shí)研究人員分別在3個(gè)平板上接種稀釋倍數(shù)為104的濾液各0.1ml，培養(yǎng)一段時(shí)間后， 平板上長(zhǎng)出菌落數(shù)分別為26、234、258，則每1ml樣品中的活菌數(shù)為_____個(gè)。還可用濾膜法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，如測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目，將濾膜放在_________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目計(jì)算出大腸桿菌的數(shù)量。

（4）對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_____。此方法用到下圖儀器，圖中甲、乙、丙指示的依次是_____。（填序號(hào)）

①安全閥、排氣閥、壓力表

②排氣閥、安全閥、壓力表

③安全閥、排氣閥、溫度表

④排氣閥、安全閥、溫度表

Answer 1

【答案】碳源 增大產(chǎn)脂肪酶菌的濃度 能增加培養(yǎng)液中的溶氧量，并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率 脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸，脂肪酸使溴甲酚紫變?yōu)辄S色 菌體產(chǎn)脂肪酶能力強(qiáng)（脂肪酶活性高或量多） 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 2.46×107 伊紅-美藍(lán) 高壓蒸汽滅菌法 ①

【解析】

根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基中含有氮源、碳源、水和無機(jī)鹽，pH為7（中性），其中碳源是橄欖油中的脂肪，為有機(jī)碳源。據(jù)圖分析，圖示為高壓蒸汽滅菌鍋，其中甲是安全閥，乙是排氣閥，丙是壓力表。

（1）培養(yǎng)基中橄欖油可以為產(chǎn)脂肪酶菌提供碳源；該培養(yǎng)基上產(chǎn)脂肪酶菌可以大量繁殖，進(jìn)而增加產(chǎn)脂肪酶菌的濃度；在培養(yǎng)過程中，使用搖床振蕩能增加培養(yǎng)液中的溶氧量，并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

（2）脂肪酶催化脂肪產(chǎn)生脂肪酸和甘油，脂肪酸使溴甲酚紫變?yōu)辄S色，因此在平板上產(chǎn)脂肪酶菌菌落的周圍會(huì)出現(xiàn)黃色圈；菌體產(chǎn)脂肪酶能力強(qiáng)，產(chǎn)生的脂肪酶越多，則菌落周圍的黃色圈直徑越大。

（3）在利用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，由于菌落會(huì)有重疊現(xiàn)象，即當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以計(jì)算得出菌體數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低。已知3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是26、234、258，菌液稀釋了104倍，體積為0.1ml，菌落計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)該取30-300的數(shù)據(jù)，則每 1ml 樣品中的活菌數(shù)=（234+258）÷2×104÷0.1ml =2.46×107個(gè)。還可用濾膜法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，如測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目，將濾膜放在伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目計(jì)算出大腸桿菌的數(shù)量。

（4）微生物培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；根據(jù)以上分析已知，圖中甲是是安全閥，乙是排氣閥，丙是壓力表，故選①。