Question

12．珙桐（2n=40）被稱為植物活化石，為進一步研究保護珙桐，科學家采集了珙桐材料進行了相關研究，回答下列問題：
（1）為了對珙桐進行擴大培養(yǎng)，可取珙桐植株的分生組織進行組織培養(yǎng)，原因是分生組織中病毒少或不含病毒．
（2）為了研究珙桐染色體數(shù)目和性狀的關系，可以采用以下兩種方式獲得多倍體珙桐．
①取珙桐幼葉細胞，用纖維素酶和果膠酶酶去除細胞壁，獲得原生質體，讓原生質體融合，形成四倍體細胞．融合細胞經過脫分化形成愈傷組織，再經過再分化形成四倍體珙桐幼苗．
②將珙桐幼苗用秋水仙素處理，秋水仙素的作用是抑制紡錘體形成．
（3）為增強珙桐的抗蟲特性，科學家將抗蟲基因導入珙桐中．
①用限制性內切酶酶從蘇云金芽孢桿菌中獲得抗蟲基因，用PCR法對基因進行擴增．②該過程的核心步驟是基因表達載體的構建．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、植物組織培養(yǎng)的過程：外植體$\stackrel{脫分化}{→}$愈傷組織$\stackrel{再分化}{→}$新植體．

解答 解：（1）分生組織中病毒少或不含病毒，因此為了對珙桐進行擴大培養(yǎng)，可取珙桐植株的分生組織進行組織培養(yǎng)，這樣可以獲得脫毒苗．
（2）①植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，去除植物細胞壁應用纖維素酶和果膠酶；將融合細胞培養(yǎng)成多倍體植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術，該技術包括脫分化和再分化兩個階段，即先經過脫分化形成愈傷組織，再經過再分化形成四倍體珙桐幼苗．
②秋水仙素的作用是抑制紡錘體的形成，導致染色體數(shù)目加倍．
（3）①獲取目的基因應該用限制酶切割；PCR技術可在體外大量擴增目的基因．
②基因工程的核心步驟是構建基因表達載體．
故答案為：
（1）分生組織中病毒少或不含病毒 
（2）纖維素酶和果膠        脫分化     愈傷組織      抑制紡錘體形成 
（3）限制性內切      PCR       基因表達載體的構建

點評 本題考查細胞工程和基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及相關應用，能結合所學的知識準確答題．