Question

6．某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能高效分解淀粉的細(xì)菌，設(shè)計(jì)了如下的實(shí)驗(yàn)步驟，請(qǐng)補(bǔ)充完善：
（1）土壤取樣：
到富含淀粉的環(huán)境中采集土樣．
（2）樣品的稀釋：
在富含纖維素的環(huán)境旁稱取土樣10g，溶于90ml無菌水制成菌液，將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋處理．
（3）接種：
先將土壤樣品稀釋液接種于經(jīng)過高壓蒸汽滅菌法滅菌處理的、以淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，該接種方法稱為稀釋涂布平板法．
（4）微生物的培養(yǎng)：
將接種后的培養(yǎng)基放入30℃恒溫箱中培養(yǎng)．為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置．
（5）篩選與純化：
將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍出現(xiàn)透明圈，則說明此種菌能夠分泌淀粉酶分解淀粉；為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明圈的大小，從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，接種于新的培養(yǎng)基平板，對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化．

Answer 1

分析 1、從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．
2、培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，富集培養(yǎng)可以使用液體培養(yǎng)基．
3、選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．如篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌必須使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．

解答 解：（2）獲取纖維素分解菌時(shí)，應(yīng)該在富含纖維素的環(huán)境中取樣；用無菌水將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋處理．
（3）培養(yǎng)基應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌法滅菌；根據(jù)第（2）題中梯度稀釋可知其采用了稀釋涂布平板法．
（4）微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)該將接種后的培養(yǎng)基放入30℃恒溫箱中培養(yǎng)．為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置．
（5）若此種菌能分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解，則將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍后，菌落周圍應(yīng)該會(huì)出現(xiàn)透明圈．
故答案為：
（1）富含纖維素的環(huán)境       稀釋
（2）高壓蒸汽滅菌     稀釋涂布平板法
（3）恒溫箱      倒置
（4）碘液

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記無菌技術(shù)，掌握不同的滅菌方法，能在不同情況下選擇合理的滅菌方法；識(shí)記實(shí)驗(yàn)室分離微生物的方法，能根據(jù)要求完善實(shí)驗(yàn)步驟，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．