Question

【題目】日前，微博傳言單位面積上手機(jī)屏幕上的細(xì)菌比馬桶按鈕上的多。下圖是某校甲、乙兩個生物興趣小組展示的實(shí)驗(yàn)調(diào)查結(jié)果。回答下列相關(guān)問題：

（1）在制備該培養(yǎng)基的過程中，除了添加微生物所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基還需滿足微生物生長對___________________等的要求。由圖中4組培養(yǎng)結(jié)果可知．該實(shí)驗(yàn)接種微生物的方法為______________________。

（2）通過觀察菌落的_________________________________（答兩點(diǎn)）等特征，可對手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上存在的微生物進(jìn)行初步鑒定。但若要進(jìn)一步確定是否存在大腸桿菌，可以加入______________________指示劑進(jìn)行鑒定，若培養(yǎng)基中出現(xiàn)___________菌落，則說明存在大腸桿菌。

（3）按圖示面積取樣，小組成員定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到四個培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計菌落數(shù)分別為38、40、42、29，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為___________個/平方厘米，為了使該實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計的數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確，應(yīng)另外設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)．請問如何設(shè)置？______________________________

Answer 1

【答案】pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣 稀釋涂布平板法 形狀、大小、隆起程度、顏色 伊紅一美藍(lán) 黑色 l.6×104 取空白培養(yǎng)基涂布01mL無菌水，在相同環(huán)境下培養(yǎng)

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法

（1）顯微鏡直接計數(shù)法

①原理：利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)； ③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）

①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

②操作

a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。

b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。

③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

（1）微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。由圖中4組培養(yǎng)結(jié)果可知．該實(shí)驗(yàn)接種微生物的方法為稀釋涂布平板法。

（2）一般菌落具有特定的形狀、大小、顏色等特征，可對手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上存在的微生物進(jìn)行初步鑒定。若要進(jìn)一步確定其中大腸桿菌的菌落數(shù)，還需要配制伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基加以鑒別。

（3）該手機(jī)屏幕的細(xì)菌密度為=（38+40+42）÷3÷0.1×10×102÷25= l.6×104個/平方厘米，為了使該實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計的數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確，應(yīng)另外設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，取空白培養(yǎng)基涂布0.1mL無菌水，在相同環(huán)境下培養(yǎng)。