Question

（07廣東五市聯(lián)考）（生物技術(shù)實踐，15分）

紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂或CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白。請回答下列有關(guān)問題：

（1）血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：             、              、          和           。

（2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。

①     加入檸檬酸鈉的目的是                                           。

②以上所述的過程即是樣品處理，它包括           、               、            、透析。

（3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離。

① 透析的目的是                                                  

②透析的原理是                                                    

（4）然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。

樣品純化的目的是                                              。

（5）提取細胞膜經(jīng)常使用的材料是哺乳動物的成熟紅細胞，原因是：                                  。（2分）

Answer 1

（1）樣品處理   粗分離  純化   純度鑒定

（2）①防止血液的凝固②紅細胞的洗滌  血紅蛋白的釋放  分離血紅蛋白溶液

（3）①將樣品中分子量較小的雜質(zhì)蛋白除去②透析袋能使小分子自由進出，而將大分子保留在袋內(nèi)

（4）通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去

（5）因為哺乳動物的成熟紅細胞沒有細胞核、沒有線粒體等由膜系統(tǒng)構(gòu)成的細胞器，這樣提取的細胞膜相對較純。