Question

1．如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線．圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點．據圖回答：
（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用HindIII和BamHI限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是A（填字母代號）．
A．啟動子    B．tet^R    C．復制原點     D．amp^R
（3）過程①可采用的操作方法是C（填字母代號）．
A．農桿菌轉化     B．大腸桿菌轉化     C．顯微注射     D．細胞融合
（4）過程②是進行胚胎體外培養(yǎng)，哺乳動物胚胎的培養(yǎng)液成分中除一些無機鹽和有機鹽類外，還需維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及（動物）血清等物質．
（5）為獲得多個遺傳性狀相同的個體，可以過程③實行胚胎分割移植技術．若針對囊胚期胚胎，需注意應將內細胞團均等分割．該技術可以獲得成功，利用了細胞的全能性．
（6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用C（填字母代號）技術．
A．核酸分子雜交                B．基因序列分析
C．抗原-抗體雜交               D．PCR．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線，包括基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟，其中過程①是將重組質粒導入受體細胞；過程②需采用胚胎移植技術．

解答 解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點，其中限制酶SmaI的切割位點位于目的基因上，所以獲取目的基因和構建基因表達載體時，應用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質粒后，會破壞質粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（2）啟動子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列．
（3）過程①是將重組質粒導入受體細胞，當受體細胞是動物細胞時，將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）哺乳動物胚胎的培養(yǎng)液成分中除一些無機鹽和有機鹽類外，還需維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及動物血清等物質．
（5）來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質，因此為獲得多個遺傳性狀相同的個體，過程②需要采用胚胎移植技術．對囊胚進行分割時，注意將內細胞團進行均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育；胚胎分割技術的理論基礎是細胞的全能性．
（6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用抗原-抗體雜交技術．
故答案為：
（1）HindIII和BamHI 　　氨芐青霉素
（2）A　　　        
（3）C
（4）（動物）血清      
（5）胚胎分割移植  內細胞團均等分割     全能
（6）C

點評 本題結合乳腺生物反應器培育過程圖和曲線圖，考查基因工程、胚胎工程、基因頻率的變化及生物進化等知識，要求考生識記基因工程的工具和操作步驟，能準確判斷圖中各過程的名稱或采用的技術；識記胚胎分割技術的理論基礎，能提取圖中有效信息答題．