Question

1．科學家從某無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了新思想．某國家重點實驗室準備探索利用基因工程生產(chǎn)單克隆抗體，請回答下列問題：
（1）實驗室已獲得無限增殖調(diào)控基因（prG）．在體外，可采用PCR技術(shù)大量擴增該目的基因．該技術(shù)的基本反應(yīng)過程：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶的作用下進行延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次．該技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物．
（2）該基因工程操作的核心是基因表達載體的構(gòu)建．本研究中，受體細胞為（經(jīng)抗原刺激）B細胞，欲將目的基因轉(zhuǎn)入受體細胞，常采用顯微注射方法．若實驗成功，則受體細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生抗體．
（3）制備單克隆抗體通常選用細胞融合技術(shù)，使（經(jīng)抗原刺激）B細胞與骨髓瘤細胞融合，融合成功的細胞經(jīng)過篩選就是所需要的雜交瘤細胞．

Answer 1

分析 1、基因工程操作的四個基本步驟是：獲取目的基因，基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細胞和目的基因的檢測與鑒定．當動物細胞作受體細胞時，一般采用顯微注射法將目的基因?qū)�入�?br />2、PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的．實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程．DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈．

解答 解：（1）PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．PCR的原理是DNA復(fù)制，需要的條件包括：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．PCR擴增DNA的過程包括：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸過程．因此，利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在Taq聚合酶的作用下延伸形成DNA．
（2）基因工程操作的四個基本步驟是：獲取目的基因，基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細胞和目的基因的檢測與鑒定．其中核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建．抗體是由已獲得免疫的（經(jīng)抗原刺激）B細胞分泌的，將目的基因?qū)�入動物細胞常采用的方法是顯微注射法，若實驗成功，則受體細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生抗體．
（3）制備單克隆抗體通常選用細胞融合技術(shù)，使（經(jīng)抗原刺激）B細胞與骨髓瘤細胞融合，融合成功的細胞經(jīng)過篩選就是所需要的雜交瘤細胞．
故答案為：
（1）PCR  變性    延伸   一段已知目的基因的核苷酸序列
（2）基因表達載體的構(gòu)建  （經(jīng)抗原刺激）B細胞  顯微注射   無限增殖  產(chǎn)生抗體
（3）（經(jīng)抗原刺激）B    骨髓瘤   雜交瘤

點評 本題主要考查PCR技術(shù)、基因工程、單克隆抗體的制備等知識，意在考查學生對書本知識的掌握和靈活運用能力，屬于基礎(chǔ)題．