Question

13．如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線．請回答：

（1）天然質粒需經(jīng)改造才能作為基因工程的運載體，改造過程需要限制酶和DNA連接酶酶，經(jīng)改造后的質粒同時具備的條件有①②③④（填序號）．
①標記基因　②一個至多個限制酶切割位點�、蹖κ荏w細胞無害�、軉�動子　⑤起始密碼子
（2）用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質粒構建重組質粒時，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ（從“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中選擇）．
（3）圖3中，①常用的導入方法是顯微注射法．在利用大腸桿菌做受體細胞時，需要先用Ca²⁺處理，使之成為感受態(tài)細胞，有利于其吸收重組DNA分子．

Answer 1

分析 分析題圖：圖1是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的過程，該過程采用了基因工程技術（①目的基因的獲取、②基因表達載體的構建、③將目的基因導入受體細胞、④目的基因的檢測與表達）、動物細胞培養(yǎng)技術和胚胎移植技術．

解答 解：（1）天然質粒往往需經(jīng)過改造才能作為基因工程中的運載體，改造過程需要限制酶和DNA連接酶；經(jīng)改造后的質粒同時具備的條件有①標記基因、②多個限制酶切割位點、③對受體細胞無害和④啟動子，而⑤起始密碼子位于mRNA上．
（2）若選EcoRⅠ會破壞質粒的復制原點；若選SmaⅠ/HindⅢ，則構建的重組質粒沒有標記基因或復制原點，所以用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質粒構建重組質粒時，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ．
（4）過程①是將目的基因導入動物受精卵，所用方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞常用感受態(tài)細胞法，即先用Ca²⁺處理，使之成為感受態(tài)細胞，有利于其吸收重組DNA分子．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶   ①②③④
（2）BamHⅠ/HindⅢ
（3）顯微注射法　感受態(tài)

點評 本題結合圖表，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作工具及其特點；識記基因工程的操作步驟，掌握其應用，能根據(jù)圖中和表中信息選擇合適的限制酶，再結合所學的知識準確答題．