Question

右圖是將人的生長激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用運(yùn)載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)。請(qǐng)回答：

 (1)一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除目的基因外，還必須有             、             和標(biāo)記基因等。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌B之前，一般要先用        處理細(xì)胞，以增加其細(xì)胞壁的通透性。

(2)將得到的細(xì)菌涂抹在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有。以上培養(yǎng)基按用途屬于             培養(yǎng)基。

(3)上述培養(yǎng)基上聚集的菌種可通過               法或             培養(yǎng)成單菌落，經(jīng)進(jìn)一步篩選即可獲得導(dǎo)入重組質(zhì)粒的工程菌。獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是無菌操作，其中對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌常用的方法是                  。

(4)在獲得目的基因的過程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種        、四種脫氧核苷酸和          的 DNA聚合酶。

Answer 1

（1）啟動(dòng)子    終止子      Ca²⁺   

（2）選擇

（3）平板劃線      稀釋涂布平板     干熱滅菌法   

（4）引物      耐高溫

解析:

（1）基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌B之前，一般要先用Ca²⁺處理細(xì)胞；（2）含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基能培養(yǎng)導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細(xì)菌，而其他的則不能生長，說明屬于選擇培養(yǎng)基；（3）將培養(yǎng)基上聚集的菌種培養(yǎng)成單菌落的方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法，對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌常用的方法是干熱滅菌法；（4）PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物、四種脫氧核苷酸和耐高溫的 DNA聚合酶。