Question

2006年12月22日，我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達到世界領(lǐng)先水平．下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：

（1）過程①②中必需用到的酶分別是

 

和

 

．
（2）綠色熒光蛋白基因之所以能與質(zhì)粒重組，原因是

 

．重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有標(biāo)記基因才能構(gòu)成一個完整的基因表達載體．
（3）將綠色熒光蛋白基因?qū)�入豬體內(nèi)并成功地表達，使豬產(chǎn)生新的性狀．這種變異屬于

 

．
（4）操作過程中一般利用未受精的卵細胞去核后做為受體，而不用普通的體細胞，原因是：

 

．為了獲得更多的豬卵細胞，可通過對母豬注射促性腺激素的方法，做

 

處理．
（5）早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及

 

等物質(zhì)．
（6）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程屬于

 

生殖．如果想同時得到多頭相同的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬，可通過

 

技術(shù)得以實現(xiàn)．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),胚胎分割移植

專題：

分析：分析圖解，可以看出該熒光克隆兔涉及了多項生物工程技術(shù)．
圖中①表示目的基因的獲��；②表示基因表達載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)�入豬胎兒的成纖維細胞，經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細胞，然后該細胞與另一只豬的卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞．
重組細胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬．
由此可見，該過程中利用基因工程、動物細胞培養(yǎng)、細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)．

解答： 解：（1）圖中①表示目的基因的獲取，②表示基因表達載體的構(gòu)建，該過程必需用到的酶分別是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶．
（2）綠色熒光蛋白基因和質(zhì)粒的化學(xué)成分都是DNA，都是雙螺旋的空間結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成相同；或有互補的堿基序列，因此能夠與質(zhì)粒重組．重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有標(biāo)記基因才能構(gòu)成一個完整的基因表達載體．
（3）基因工程就是利用了基因重組的原理．
（4）卵細胞大易操作、分化程度低，體細胞的細胞核在卵細胞質(zhì)中能表現(xiàn)出全能性，因此操作過程中一般利用未受精的卵細胞去核后做為受體，而不用普通的體細胞．為了獲得更多的豬卵細胞，可通過對母豬注射促性腺激素的方法，做超數(shù)排卵處理．
（5）胚胎培養(yǎng)的營養(yǎng)成分有無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、動物血清等．其中動物血清是動物細胞培養(yǎng)或動物胚胎培養(yǎng)所不能缺少的．
（6）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程利用了細胞核移植技術(shù)，該技術(shù)屬于無性生殖．如果想同時得到多頭相同的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬，可通過胚胎分割技術(shù)得以實現(xiàn)．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）  DNA連接酶
（2）該基因和質(zhì)粒的化學(xué)成分都是DNA，都是雙螺旋的空間結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成相同；或有互補的堿基序列
（3）基因重組
（4）卵細胞大易操作、分化程度低，體細胞的細胞核在卵細胞質(zhì)中能表現(xiàn)出全能性   超數(shù)排卵      
（5）血清      
（6）無性      胚胎分割

點評：本題難度適中，屬于考綱中理解層次的要求，考查基因工程、胚胎工程的相關(guān)知識，該過程中利用基因工程、動物細胞培養(yǎng)、細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，要求考生具有一定的識圖能力和理解能力．考生要識記基因工程的操作工具；明確目的基因能夠與質(zhì)粒發(fā)生重組的原因；識記卵細胞的特點等．