Question

【題目】回答基因工程的基本操作程序中的有關(guān)問題。

（1）目的基因的獲�。簽樵诙虝r間內(nèi)大量獲得目的基因，可用________擴增的方法，其原理是________。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：基因表達載體的組成，除具有復制原點、目的基因外，還必須具有啟動子、 、標記基因等。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，是 識別和結(jié)合的部位。標記基因的作用是為了________。

（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：將目的基因?qū)�入某單子葉植物細胞，常采用的方法是____；將目的基因?qū)�入動物細胞，常采用的受體細胞是________；將目的基因?qū)�入大腸桿菌，大腸桿菌應(yīng)先用________處理，使其處于能吸收周圍DNA的狀態(tài)。

（4）目的基因的檢測與鑒定：檢測目的基因是否表達，在分子水平上可采用的檢測辦法是_________；在個體水平上，如抗蟲棉，需要做 。

Answer 1

【答案】（1）PCR技術(shù) DNA復制

（2）終止子 RNA聚合酶 鑒別和篩選含有目的基因的細胞

（3）基因槍法 受精卵 Ca2＋

（4）抗原—抗體雜交 抗蟲的接種實驗

【解析】（1）基因工程中一般用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理是DNA分子的復制。

（2）基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位；標記基因的作用是為了鑒別和篩選含有目的基因的細胞。

（3）將目的基因?qū)�入單子葉植物常用基因槍法；導入動物細胞常用顯微注射法，其受體細胞為受精卵；將目的基因?qū)�入大腸桿菌，要先用氯化鈣處理，使得大腸桿菌處于感受態(tài)，易于吸收周圍的DNA。

（4）檢測目的基因是否表達，在分子水平上可采用的檢測辦法是抗原—抗體雜交；在個體水平上，如抗蟲棉，需要做抗蟲的接種實驗。