Question

16．自生固氮菌，能獨(dú)立完成固氮作用，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的用途．研究人員從土壤中篩選高效的自生固氮菌株，并對(duì)其固氮能力進(jìn)行了研究．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）為鑒別菌種，可以采用平板劃線法或（稀釋）涂布平板法法，在固體（物理性質(zhì)）培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，觀察所獲單個(gè)菌落特征．
（2）以上操作過(guò)程中有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培養(yǎng)微生物用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②操作者的雙手；③玻棒、試管、燒瓶和吸管．其中需要滅菌的是①③．（填序號(hào)）
（3）某同學(xué)待平板冷凝后，將平板倒置，他的目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，防止雜菌污染．經(jīng)接種、培養(yǎng)后的菌落分布如右圖所示，推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻．
（4）為了進(jìn)一步篩選高效固氮菌，研究人員將上述獲得的等量的四種固氮菌分別接種到等量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)相同時(shí)間后，對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)并測(cè)定培養(yǎng)液中的含氮量，結(jié)果如表：

	甲菌	乙菌	丙菌	丁菌
菌量（個(gè)/mL）	2.1×105	2.5×105	1.8×105	2.0×105
含氮量（K）	3.32	4.38	5.34	5.36

①培養(yǎng)過(guò)程中需不斷振蕩的目的是讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸．
②對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少．
③由上表結(jié)果可知，丙菌的固氮效率最高．

Answer 1

分析 1、細(xì)菌菌落特征：菌落較小，形狀表面或光滑黏稠，或粗糙干燥，易挑起，多為白色；而真菌落特征：菌落較大、菌絲細(xì)長(zhǎng)，菌落疏松，呈絨毛狀、蜘蛛網(wǎng)狀、棉絮狀，無(wú)固定大小，多有光澤，不易挑，有時(shí)還呈現(xiàn)紅色、褐色、綠色、黑色、黃色等不同的顏色（孢子的顏色）．
2、自生固氮菌是指在土壤中能夠獨(dú)立進(jìn)行固氮的細(xì)菌，可以利用氮?dú)庾鳛榈�源，所以培養(yǎng)基中不需要加氮源．
3、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法；鑒別菌種時(shí)應(yīng)該在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行接種．
（2）①培養(yǎng)微生物用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿需要進(jìn)行滅菌處理；②操作者的雙手需要用酒精消毒；③玻棒、試管、燒瓶和吸管需要滅菌處理．
（3）倒平板的目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，防止雜菌污染．圖中菌落集中在某一區(qū)域，其原因可能是涂布不均勻．
（4）①為了讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸，在培養(yǎng)過(guò)程中需不斷振蕩．
②若想對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，可采用的接種方法是稀釋涂布平板法，由于一個(gè)菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌長(zhǎng)成，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少．
③由上述結(jié)果可知，丙菌數(shù)量最少，但固氮量最多，因此可判斷出丙菌的固氮效率最高．
故答案為：
（1）（稀釋）涂布平板法    固體   
（2）①③
（3）防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，防止雜菌污染（答一點(diǎn)即可）      涂布不均勻
（4）①讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸�、谏佟、郾�

點(diǎn)評(píng) 本題考查結(jié)合表格數(shù)據(jù)，考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合表中數(shù)據(jù)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．