家蠶細(xì)胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。

(1)進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。

(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。

(3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

 

 

（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） （2）啟動子 終止子 （3）TaqDNA聚合酶　 對干擾素基因特異性的DNA引物對 （4）增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積

 

考查的知識點為動物細(xì)胞培養(yǎng)和基因工程.

(1)為了使組織分散開為單個細(xì)胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶。

(2)啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端。

(3)PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)擴增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA 、TaqDNA聚合酶、兩種引物。

(4)細(xì)胞離體培養(yǎng)時通常表現(xiàn)出：貼壁生長和接觸抑制，多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大貼壁生長的附著面積，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量.

 

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年遼寧省盤錦市二中高二下學(xué)期期初考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（14分）回答有關(guān)生物工程的問題：
（1）構(gòu)建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生__末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生_（相同不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構(gòu)建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是提供________特異性識別結(jié)合位點，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。在用表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，常用___處理大腸桿菌，以利于表達載體進入：為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與__________雜交，該雜交技術(shù)稱為_________。
（3）如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的______中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將_____插入植物細(xì)胞的染色體___上。
(4)家蠶細(xì)胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。
(5)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

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科目：高中生物 來源：2010—2011學(xué)年山東省鄒城一中高二下學(xué)期期末考試生物試卷 題型：綜合題

Ⅰ、家蠶細(xì)胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大
規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。
(1)進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。
(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。
Ⅱ、動物乳腺生物反應(yīng)器已成為生物技術(shù)領(lǐng)域發(fā)展的尖端方向，具有廣闊的開發(fā)前景。
十多年來，已有數(shù)十種人體蛋白在動物乳汁中生產(chǎn)出來，在小鼠乳腺中獲得表達的產(chǎn)品更是多達數(shù)百種
（1）在獲得人的蛋白基因后，可通過         技術(shù)在短時間內(nèi)得到大量的這種基因
（2）將人的蛋白基因?qū)胄∈蟮氖荏w細(xì)胞，常用方法是               。
（3）進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入              中，并通常采用         技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組。

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科目：高中生物 來源：2013屆海南省瓊海市嘉積中學(xué)高三上學(xué)期教學(xué)質(zhì)量監(jiān)測（四）生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）   。
（1）對于基因工程來說，其核心是                               ；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是                      。
（2）植物體細(xì)胞雜交過程有兩個關(guān)鍵，一個是在把植物細(xì)胞雜交之前，必須               
                   ；另外一個是                                 。
（3）在進行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細(xì)胞進行融合，一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞，另外一種是                      ；誘導(dǎo)該兩種細(xì)胞融合常用的因素有PEG、電激、                    等。
（4）胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的              性，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生           。
（5）家蠶細(xì)胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。
①進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。
②為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。
③采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反應(yīng)過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是                                              。
利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

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科目：高中生物 來源：2013-2014學(xué)年甘肅省高三9月月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

家蠶細(xì)胞具有高效表達外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培

養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥。

(1)進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用________________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。

(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的________和________之間。

(3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴增緩沖液(含Mg2＋)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。

(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以________，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

 

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科目：高中生物 來源：2013屆遼寧省盤錦市高二下學(xué)期期初考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

（14分）回答有關(guān)生物工程的問題：

（1）構(gòu)建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生__末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生_（相同不同）粘性末端的限制酶。

（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構(gòu)建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是提供________特異性識別結(jié)合位點，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。在用表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，常用___處理大腸桿菌，以利于表達載體進入：為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與__________雜交，該雜交技術(shù)稱為_________。

（3）如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的______中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將_____插入植物細(xì)胞的染色體___上。

(4)家蠶細(xì)胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。

(5)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

(6)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

 

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