Question

【題目】近期，5只生物鐘紊亂的體細胞克隆猴登上中國綜合英文期刊《國家科學評論》封面，標志著中國體細胞克隆技術走向成熟。下圖為克隆猴的步驟，請回答下列問題：

（1）在各級神經(jīng)中樞中，與猴子生物節(jié)律控制有關的中樞位于________________。除了腦部主生物鐘外，在肝臟、胰臟等器官中還存在局部生物鐘，敲除猴子肝臟細胞中的生物鐘基因后，出現(xiàn)低血糖癥狀，其原因可能是______________________________________________。

（2）核移植前需將A猴卵母細胞培養(yǎng)至_________________期，并進行去核操作，其目的是__________________________________________。從細胞水平分析，與取B猴體細胞的細胞核進行移植相比，直接將B猴體細胞注人去核A猴卵母細胞的優(yōu)勢是________________________。

（3）重組細胞進行體外培養(yǎng)，需要氣體環(huán)境和無菌、無毒的環(huán)境，其中前者需要的氣體主要是_____________；后者的具體操作有_______________________________(答三點)。

Answer 1

【答案】下丘腦 肝臟細胞中的肝糖原分解產生葡萄糖并進入血液中，受生物鐘基因調控 減數(shù)第二次分裂中 保證克隆猴的遺傳物質主要來自B猴 避免取核過程對核造成損傷 O2和CO2 對培養(yǎng)皿和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液

【解析】

動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件

（1）充足的營養(yǎng)供給--微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。

（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（3）無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（1）與生物節(jié)律控制有關的中樞位于下丘腦。除了腦部主生物鐘外，在肝臟、胰臟等器官中還存在局部生物鐘，敲除猴子肝臟細胞中的生物鐘基因后，出現(xiàn)低血糖癥狀，其原因可能是肝臟細胞中的肝糖原分解產生葡萄糖并進入血液中，受生物鐘基因調控。

（2）核移植前需將A猴卵母細胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，并進行去核操作，其目的是保證克隆猴的遺傳物質主要來自B猴。從細胞水平分析，與取B猴體細胞的細胞核進行移植相比，直接將B猴體細胞注人去核A猴卵母細胞可以避免取核過程對核造成損傷。

（3）重組細胞進行體外培養(yǎng)，需要的氣體環(huán)境主要是O2和CO2；保證無菌無毒環(huán)境的具體操作有對培養(yǎng)皿和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液。