Question

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告并回答有關(guān)問題。

I、實(shí)驗(yàn)原理：                                                                 。根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。

II、實(shí)驗(yàn)材料：活的小白鼠胚胎。

III、藥品用具：胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時(shí)期的高倍顯微照片。

IV、實(shí)驗(yàn)步驟：

（1）制備細(xì)胞懸浮液：

把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。

（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)：

①取A、B、C三個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，                                    。

②向A、B兩培養(yǎng)瓶中分別加入等量的化學(xué)物質(zhì)甲、乙，并將培養(yǎng)瓶搖勻。

③                                                                。

（3）制作臨時(shí)裝片：

①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出三個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細(xì)胞從瓶壁上脫落，再加入動(dòng)物細(xì)胞固定液以迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相。

②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，                                     ，3~5min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)：

  把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于             期的細(xì)胞，并與                                                          對(duì)比以確認(rèn)發(fā)生上述變異的細(xì)胞，同時(shí)統(tǒng)計(jì)該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）。

V、結(jié)果分析與結(jié)論：

經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：Q_A=1.3%，Q_B=12.5%，Q_C=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是                                        。

VI、回答問題：

在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶所起的作用與小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂各時(shí)期高倍顯微照片有何不同？                                                                    。

Answer 1

I、有毒物質(zhì)加入細(xì)胞培養(yǎng)液后，培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目的變異。    IV、（2）①分別加入等量的細(xì)胞懸浮液      ③把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37℃（或適宜溫度）的恒溫箱中培養(yǎng)（3）加1~2滴龍膽紫液染色 （4）有絲分裂中期     小白鼠正常細(xì)胞有絲分裂中期高倍顯微照片

V．甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大

VI．C瓶作為A、B兩瓶的對(duì)照組，起對(duì)照作用。

解析:

化學(xué)藥劑、溫度的劇變等，內(nèi)因有生物體內(nèi)代謝過程的失調(diào)、衰老等。在這些因素的作用下，染色體可能發(fā)生變異。這種變異可在顯微鏡下直接觀察到�？梢岳�用變異細(xì)胞的數(shù)目占觀察細(xì)胞數(shù)目的比例來判斷物質(zhì)毒性強(qiáng)弱。