Question

【題目】某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而開展了一個探究實驗，實驗過程包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計數等。請回答下列問題：

（1）制備培養(yǎng)基時，配方一般都含有水、碳源、氮源和________________________。

（2）接種環(huán)在接種前必須__________________________滅菌，然后待其冷卻后再進行接種，冷卻的目的是_____________。

（3）用稀釋涂布平板法計數細菌個數時，為使估計值更接近實際值，應保證待測樣品稀釋度足夠高，原因是__________________________。

（4）將1mL水樣稀釋100倍后在3個平板上用涂布法分別接入0.lmL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數分別為46、40、37。據此可得出每升水樣中的活菌數為__________________________。統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目__________________________。

（5）可通過觀察平板上菌落的特征，如_____________（寫兩個），來判斷湖水樣品中細菌的種類。

（6）為了使實驗結果可靠，應同時在另一滅菌的空白平板上接種_____________作為對照組。

Answer 1

【答案】 無機鹽 灼燒 避免接種環(huán)境溫度太高，殺死菌種 稀釋度高的菌液中，微生物被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表明形成的單個菌落 4.1×107 低 形狀、大小、隆起程度、顏色 無菌水

【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)，識記微生物培養(yǎng)中的相關知識點是解題關鍵

（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽

（2）對接種環(huán)等接種工具用灼燒滅菌法，接種環(huán)在接種前必須灼燒滅菌，然后待其冷卻后再進行接種，避免接種環(huán)境溫度太高，殺死菌種。

（3）稀釋涂布法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布在固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，所以用稀釋涂布平板法計數細菌個數時，為使估計值更接近實際值，應保證待測樣品稀釋度足夠高。

（4）因為不同平板之間的數據有差異，故用其平均值作為估算的最終結果，故每升水樣中的活菌數為4.1×107; 有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡,另外有些菌落是由多個活菌共同形成的,所以按形成的菌落數目來計算活菌數目,結果往往會低于活菌實際數目

（5）菌落特征包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質地、隆起程度、顏色和透明程度等

(6) 為了使實驗結果可靠，應同時在另一滅菌的空白平板上接種無菌水作為對照組。

[點睛]： 微生物培養(yǎng)的易考點①培養(yǎng)基：包括組成成分、種類、②常用接種方法:平板劃線法一般多用于菌種的純化,可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離; 稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株,可以計數，可以觀察菌落特征.③無菌技術：注意滅菌與消毒的區(qū)別；④計數：顯微鏡直接計數和間接計數法；⑤操作過程的注意事項等。