Question

13．長木蜂有在蜂巢內(nèi)儲存蜂糧（主要是長木蜂咀嚼過的花粉）的習性，其儲存的蜂糧在蜂室中能長期保存不變質(zhì)．研究人員為篩選出蜂糧中具有抑菌作用的微生物，幵展實驗如下：
（1）配置培養(yǎng)基．稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等營養(yǎng)物質(zhì)，再加入瓊脂和適量的水，配置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中可提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨．另配置適于乳酸菌生長的MRS培養(yǎng)基．
（2）系列稀釋操作．將一批盛有9mL水的試管作滅菌處理；從三個蜂巢采集蜂糧各lg，分別加入含有9mL水的試管中混勻，可將移液管上的橡皮頭按壓三次（多次）（洗耳球）；移液管不能重復使用的原因除了需要避免混合上一個稀釋濃度的殘留液會使稀釋不準確外，還有原因是不同蜂巢中的微生物可能不同．
（3）涂布、培養(yǎng)和計數(shù)．將各稀釋濃度的試管，分別吸取0．lmL，在兩種培養(yǎng)基上涂布均勻，并在適宜條件下培養(yǎng)．根據(jù)菌落的大小、顏色、厚度、邊緣性狀、粗糙或濕潤、能否治病（至少寫出三項）等特征初步判斷微生物的種類．若在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上最多發(fā)現(xiàn)有51種微生物生長，在MRS培養(yǎng)基上最多有17種微生物生長，則實際蜂糧中的微生物種類可
能（填“可能”或“不可能”）大于68種．
（4）篩選具有抑菌作用的微生物．用接種針挑取一種微生物的菌落，分別接種到富含青霉菌（A組）、枯草芽孢桿菌（B組）、啤酒酵母（C組）的培養(yǎng)基中，每組選取一個平板接種三個位點，實驗結(jié)果見圖．其中作為對照的是A1、B1、C1組；分析實驗結(jié)果，對該微生物抑制作用最弱的微生物是青霉菌．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形狀、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的顏色、（5）菌落的透明度．

解答 解：（1）分析題意可知，實驗需要篩選出蜂糧中具有抑菌作用的微生物，因此培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基需要加入瓊脂作為凝固劑；配置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中牛肉膏、蛋白胨可以提供碳源．
（2）微生物的分離與培養(yǎng)過程，關(guān)鍵是防止雜菌的污染，因此盛有9mL水的試管需要滅菌處理；稀釋培養(yǎng)液時，可將移液管上的橡皮頭按壓三次（多次）；移液管不能重復使用的原因除了需要避免混合上一個稀釋濃度的殘留液會使稀釋不準確外，不同蜂巢中的微生物也可能不同．
（3）菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形狀、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的顏色、（5）菌落的透明度．若在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上最多發(fā)現(xiàn)有51種微生物生長，這51種微生物為需氧型微生物；而MRS培養(yǎng)基適于乳酸菌生長的，即該培養(yǎng)基篩選的微生物為厭氧型微生物，因此實際蜂糧中的微生物種類 可能大于68種．
（4）根據(jù)題意可知，“每組選取一個平板接種三個位點”，則接種的為實驗組，其余為對照組，即作為對照的是A1、B1、C1組；分析實驗結(jié)果，A2培養(yǎng)基中菌落數(shù)最少，因此對該微生物抑制作用最弱的微生物是青霉菌．
故答案為：
（1）瓊脂      牛肉膏、蛋白胨
（2）滅菌    按壓三次（多次）       不同蜂巢中的微生物可能不同
（3）大小、顏色、厚度、邊緣性狀、粗糙或濕潤、能否治病       可能
（4）A1、B1、C1     青霉菌

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠識記菌落的概念和特征，識記培養(yǎng)基的成分，掌握篩選微生物的操作流程，再結(jié)合題干信息準確答題．