Question

（8分）苦馬豆素(SW)最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得，為了研究SW是否具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用，許多學(xué)者做了大量研究，實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

①取小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞。

②制成單細(xì)胞懸液，等量接種于多孔板，加入等量培養(yǎng)液，每組設(shè)5個(gè)平行孔。

③于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。

④加入等量不同濃度的SW溶液，于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

⑤分別在24 h、48 h、72 h時(shí)吸取培養(yǎng)液，觀察記錄結(jié)果，得到不同濃度的SW對細(xì)胞存活率的影響曲線如圖所示。

⑥將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心，細(xì)胞染色，在熒光顯微鏡下觀察拍照，記錄正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞的數(shù)目，并采用免疫熒光細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)量狀況，匯總統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表。

培養(yǎng)48h后細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)狀況

SW（μg/ml）	癌細(xì)胞數(shù)目	凋亡細(xì)胞數(shù)目	Bax蛋白	Bcl-2蛋白
2	+	++++	++++	+
1	++	+++	+++	++
0.5	+++	++	++	+++
0	++++	+	+	++++

注：“+”的數(shù)量表示相對值的大小

回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)中首先將小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是 。培養(yǎng)箱中要有適量的無菌空氣，原因是 。肝癌細(xì)胞懸液中細(xì)胞有懸浮生長的特征，可能的原因是 。

（2）實(shí)驗(yàn)中利用多孔板培養(yǎng)時(shí)，每組設(shè)置5個(gè)平行孔同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)，計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值是為了 。

（3）分析圖中曲線可知，SW對肝癌Hepal-6細(xì)胞的作用效果是：①

；② 。

（4）表中結(jié)果說明SW可以誘發(fā)細(xì)胞 ，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長，從分子水平上分析，SW可能是導(dǎo)致癌細(xì)胞內(nèi) 的合成量增加。

Answer 1

（1）細(xì)胞克�。�細(xì)胞分裂、細(xì)胞增殖） 細(xì)胞需進(jìn)行有氧呼吸 癌細(xì)胞表面糖蛋白減少，細(xì)胞黏著性小

（2）減小偶然性誤差（并使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信）

（3）①SW濃度越高，對細(xì)胞生長（存活）的抑制作用越強(qiáng)

②SW作用時(shí)間越長，對細(xì)胞生長（存活）的抑制作用越強(qiáng)

（4）凋亡 Bax蛋白

【解析】

試題分析：

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，把組織分散成單個(gè)細(xì)胞，可以防止接觸抑制，給予適宜的環(huán)境，目的是讓細(xì)胞增殖；培養(yǎng)箱中要有適量的無菌空氣，是因?yàn)榧?xì)胞的生長需要進(jìn)行有氧呼吸；癌細(xì)胞的特點(diǎn)之一是糖蛋白減少，細(xì)胞黏著性降低，因此培養(yǎng)過程中細(xì)胞會(huì)懸浮生長。

（2）實(shí)驗(yàn)中利用多孔板培養(yǎng)時(shí)，每組設(shè)置5個(gè)平行孔同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)，計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值是為了減小偶然誤差并使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信。

（3）分析坐標(biāo)曲線可知，在相同作用時(shí)間，不同SW濃度對小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制，且隨著SW濃度增加，抑制作用增強(qiáng)；同一SW濃度，不同作用時(shí)間對對小鼠肝癌Hepal-6細(xì)胞有抑制，且隨著SW作用時(shí)間增加，抑制作用增強(qiáng)。

（4）分析表格信息可知：SW濃度越高，對細(xì)胞生長（存活）的抑制作用越強(qiáng)，細(xì)胞凋亡數(shù)量越多，Bax蛋白越多，因此可以推測可能是由于SW導(dǎo)致癌細(xì)胞內(nèi)Bax蛋白合成量增多。

考點(diǎn)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞癌變的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力；能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問題。

考點(diǎn)分析： 考點(diǎn)1：細(xì)胞工程 試題屬性

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