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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年湖南省益陽市一中高二上學(xué)期期末考試?yán)砜粕镌嚲恚◣Ы馕觯?/span> 題型:綜合題
降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低,半衰期較短。某科研機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素,將人工合成的降鈣素DNA與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功的在大腸桿菌中得以表達(dá)。操作大體過程如下圖1、圖2,據(jù)圖回答下列問題:
(1)圖1示人工合成降鈣素DNA的過程。從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā),推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個(gè)堿基對形成部分雙鏈DNA片段,再利用Klenow酶補(bǔ)平,獲得雙鏈DNA。從功能看,Klenow酶是一種___________酶,合成的雙鏈DNA有________個(gè)堿基對。
(2)圖2將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌最常用的方法是用 處理,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
(3)如果要通過基因工程獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是 。
(4)以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法正確的是( )
A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)
B.蛋白質(zhì)工程就是酶工程的延伸
C.蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造
D.蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然的蛋白質(zhì)
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科目:高中生物 來源:2015屆吉林省高二上期期末考試生物卷(解析版) 題型:綜合題
請回答基因工程方面的有關(guān)問題:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈 DNA 片段,它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。
①從理論上推測,第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例為________。
②在第________輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的 DNA 片段。
(2)設(shè)計(jì)引物是 PCR 技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理(如下圖),請分別說明理由。
①第 1 組:________________________;
②第 2 組:________________________。
(3)PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶,下面的表達(dá)式不能正確反映 DNA 聚合酶的功能,這是因?yàn)開___________________________________________________________。
(4)用限制酶 EcoRV 、MboⅠ單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒,得到的 DNA 片段長度如下圖(1 kb 即 1 000 個(gè)堿基對),請畫出質(zhì)粒上 EcoRV 、MboⅠ的切割位點(diǎn)。
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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年浙江省高三高考仿真模擬理科生物試卷 題型:綜合題
肺細(xì)胞中的let一7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let一7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)增強(qiáng)后,發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。
(1)進(jìn)行過程①時(shí),需用 酶切開載體以插入let一7基因。進(jìn)行過程②時(shí),需用 酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于 細(xì)胞培養(yǎng)。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增let一7基因時(shí),在PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在該反應(yīng)體系中,目的基因擴(kuò)增了5代,則具有引物I的DNA所占的比例理論上為 。
(2)研究發(fā)現(xiàn),let一7基因能影響癌基因RAS的表達(dá),其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析,可從細(xì)胞中提取 進(jìn)行分子雜交,以直接檢測1et一7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中 (RASmRNA/RAS蛋白質(zhì))含量減少引起的。
(3)現(xiàn)有一長度為1000堿基對(bp)的DNA分子,用限制酶切開后得到仍是長度為1000 bp的DNA分子,說明此DNA分子的形態(tài)為 。
(4)某線性DNA分子分別用限制酶Hind Ⅲ和Sma I處理,然后用這兩種酶同時(shí)處理,得到如下片段(kb為千個(gè)堿基對):
限制酶 |
片段及長度 |
Hind Ⅲ |
2.5 kb,5.0 kb |
Sma I |
2.0 kb,5.5 kb |
Hind Ⅲ和Sma I |
2.5 kb,3.0 kb,2.0 kb |
可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分別有 個(gè)識別序列。兩酶同時(shí)處理后得到的片段,再用限制酶EcoR I處理,結(jié)果導(dǎo)致凝膠上3.0 kb的片段消失,產(chǎn)生一種1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I將該線性DNA分子進(jìn)行切割,則可得到長度分別為 的片段。
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科目:高中生物 來源:2014屆湖南省益陽市高二上學(xué)期期末考試?yán)砜粕镌嚲恚ń馕霭妫?/span> 題型:綜合題
降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低,半衰期較短。某科研機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素,將人工合成的降鈣素DNA與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功的在大腸桿菌中得以表達(dá)。操作大體過程如下圖1、圖2,據(jù)圖回答下列問題:
(1)圖1示人工合成降鈣素DNA的過程。從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā),推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個(gè)堿基對形成部分雙鏈DNA片段,再利用Klenow酶補(bǔ)平,獲得雙鏈DNA。從功能看,Klenow酶是一種___________酶,合成的雙鏈DNA有________個(gè)堿基對。
(2)圖2將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌最常用的方法是用 處理,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
(3)如果要通過基因工程獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是 。
(4)以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法正確的是( )
A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)
B.蛋白質(zhì)工程就是酶工程的延伸
C.蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造
D.蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然的蛋白質(zhì)
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科目:高中生物 來源:2010年廣東省高二上學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
(每空2分,共11分)請分析回答基因工程的相關(guān)問題:
(1)(3分)基因工程的理論基礎(chǔ)是 法則,可用公式(圖解)表示為
。?
(2)(4分)利用PCR技術(shù)(全稱: )可以擴(kuò)增目的基因,即在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制獲得大量DNA克隆分子。某樣品DNA中共含有3000個(gè)堿基對,堿基數(shù)量滿足:(A+T):(G+C)=1 :2,現(xiàn)計(jì)劃通過PCR得到100個(gè)與樣品相同的DNA,至少需要向試管中加入 個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。
(3)(4分)為了解基因結(jié)構(gòu),通常選取一特定長度的線性DNA分子,先用一種限制酶切割,通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分離,計(jì)算相對大;然后再用另一種酶對單酶水解片段進(jìn)行降解,分析片斷大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
已知一線性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對) |
第一步水解 |
產(chǎn)物 (單位bp) |
第二步水解 |
產(chǎn)物 (單位bp) |
A酶切割 |
1900 |
將第一步水解產(chǎn)物分離后,分別用B酶切割 |
1700 200 |
|
1500 |
800 700 |
|||
1600 |
1100 500 |
由實(shí)驗(yàn)可知,在這段已知序列上,A酶與B酶的識別序列分別為 個(gè)和 個(gè)。
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