Question

1979年，科學(xué)家將鼠體內(nèi)的能夠產(chǎn)生胰島素的基因與大腸桿菌的DNA分子重組，并且在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)了胰島素。如下圖所示，請據(jù)圖回答：

（1）圖中［2］、［5］、［3］、［7］表示通過_____________的途徑，獲得_________的過程。

（2）圖中［3］代表_________，在它的作用是______________；［9］代表_____________，在它的作用實質(zhì)是兩個DNA的單鏈末端之間形成____________________鍵。

（3）［8］代表_________，其往往含有_________基因，以便將來檢測。如何構(gòu)建［8］呢？其步驟是：

①_______________________________________________________________

②_______________________________________________________________

③_______________________________________________________________

（4）圖中［10］表示將_________的過程，為使此過程順利進行，一般須將［11］用________處理，以增大［11］細(xì)胞壁的_________。

（5）［11］表示［8］隨大腸桿菌的繁殖而進行___________。

（6）如在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)了胰島素，說明_________________________。

Answer 1

（1）從供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因  目的基因 

（2）限制性內(nèi)切酶  識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開      DNA連接酶  磷酸二酯鍵

（3）重組DNA    標(biāo)記  步驟：

①用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個黏性末端的切口；

②用同種限制酶切斷目的基因，產(chǎn)生相同的黏性末端；

③將切下的基因片段，插入到質(zhì)粒的切口處，再加上適量DNA連接酶，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。

（4）重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞  CaCl₂  通透性  

（5）復(fù)制

（6）目的基因完成了表達(dá)的過程