Question

【題目】測定水樣是否符合飲用水衛(wèi)生標準，常用濾膜法測定大腸桿菌的數目。流程如圖所示，濾膜法的大致流程：用濾膜過濾待測水樣→水樣中的細菌留在濾膜上→將濾膜轉移到伊紅美藍的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數目。據圖回答問題：

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進行滅菌處理的是________。與過濾有關的操作都要在________________進行。

（2）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，這屬于微生物培養(yǎng)中的________操作，從物理狀態(tài)角度分析，EMB培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。

（3）某生物興趣小組的某同學嘗試按照上述方法進行測定，無菌操作下將10ml待測水樣加入到90ml無菌水中，稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養(yǎng)基上的菌落數平均為124，黑色菌落數平均為31，則推測1升待測水樣中的大腸桿菌數目為________個。

（4）該同學進一步思考，利用濾膜法也可能用于測定待測水樣中其他微生物的數目。他取了兩份水樣，一份待測水樣來自變酸的果酒，從中檢測到兩種微生物，它們在結構上的主要區(qū)別是________，另一份來自昌源河，若要通過測量藍藻的數目來研究水華，應更換上述過濾裝置中的濾膜，為了減少細菌的干擾，應選擇孔徑________（填“更小”或“不變”或“更大”）的濾膜。

Answer 1

【答案】濾杯、濾膜和濾瓶 酒精燈火焰旁 接種 固體 3100 有無成形的細胞核 更大

【解析】

濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅-美藍培養(yǎng)基上，經培養(yǎng)后計數和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落即可推測計算出水樣中的大腸桿菌數；伊紅為酸性染料，美藍為堿性染料，大腸桿菌在伊紅-美藍培養(yǎng)基的菌落呈深紫色，并有金屬光澤。

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，三者都需要進行滅菌處理；為了防止雜菌的污染，與過濾有關的操作都要在酒精燈火焰旁進行。

（2）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，這屬于微生物培養(yǎng)中的接種操作；從物理狀態(tài)角度分析，EMB培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。

（3）根據題意分析，10ml待測水樣經過稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養(yǎng)基上的菌落數平均為124，黑色菌落數平均為31，其中黑色菌落為大腸桿菌，則推測1升待測水樣中的大腸桿菌數目=31÷10×1000=3100個。

（4）變酸的果酒中存在酵母菌和醋酸菌兩種微生物，分別屬于真核生物和原核生物，兩者在結構上的主要區(qū)別是有無成形的細胞核；若要通過測量藍藻的數目來研究水華，應更換上述過濾裝置中的濾膜，由于單個藍藻細胞的直徑比細菌細胞的大，為了減少細菌的干擾，應選擇孔徑更大的濾膜。