Question

【題目】如圖表示血紅蛋白提取和分離實驗的部分裝置或操作方法，請回答下列問題：

（1）為了提取和分離血紅蛋白，首先對紅細胞進行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，洗滌時應使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是______________________________________________。

（2）如圖甲表示______________過程，該操作目的是去除樣品中______________的雜質(zhì)。現(xiàn)有一定量的血紅蛋白溶液，進行上述操作時若要盡快達到理想的實驗效果，可以________________________（寫出一種方法）。一段時間后，若向燒杯中加入雙縮脲試劑，透析袋內(nèi)溶液是否出現(xiàn)紫色，請說明判斷的依據(jù): ______________________________________。

（3）如圖乙，往色譜柱中加樣的正確操作順序是______________（用序號表示）。在進行④操作前，應該等樣品____________________________，且要______________（填“打開”或“關(guān)閉”）下端出口。

（4）如圖丙，a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是______，原因是______________________________________________。

Answer 1

【答案】防止紅細胞吸水漲破 透析（粗分離） 分子量較小 增加緩沖液的量 雙縮脲試劑與袋內(nèi)的血紅蛋白發(fā)生反應，會產(chǎn)生紫色物質(zhì) ②③④① 完全進入凝膠層 關(guān)閉 a a相對分子質(zhì)量較大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快

【解析】

血紅蛋白提取和分離原理，蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)：形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別，由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。

凝膠色譜法原理：分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。

（1）為了提取和分離血紅蛋白，首先對紅細胞進行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，洗滌時應使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是生理鹽水保持紅細胞滲透壓的穩(wěn)定而不破碎，在未洗凈血漿中雜質(zhì)蛋白前，紅細胞如果破裂了，就可能使血紅蛋白和雜質(zhì)蛋白混在一起，加大了分離難度。

（2）圖甲表示血紅蛋白的透析過程，即血紅蛋白的粗分離，目的是去掉分子量較小的雜質(zhì)。進行上述操作時若要盡快達到理想的實驗效果，可以增加緩沖液的量。一段時間后，若向燒杯中加入雙縮脲試劑，雙縮脲試劑與袋內(nèi)的血紅蛋白發(fā)生反應，會產(chǎn)生紫色物質(zhì)。

（3）如圖乙，往色譜柱中加樣的正確操作順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進行分析，可以得出是②③④①。在進行④操作前，應該等樣品完全進入凝膠層，且要關(guān)閉下端出口。

（4）如圖丙，a、b均為蛋白質(zhì)分子，a相對分子質(zhì)量較大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快，所以a先從層析柱中洗脫出來。