Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題：

(一)各種微生物對(duì)氧的需求是不同的，研究組開展了氧對(duì)微生物的影響實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問題：

(1)將含有LB固體培養(yǎng)基(剛配好，尚未凝固)的錐形瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋，若在121 ℃條件下滅菌，則滅菌時(shí)間一般為________min，滅菌時(shí)間從________________開始。滅完菌后將錐形瓶取出，待溫度下降到60 ℃(不燙手的溫度)時(shí)，用________擦拭桌面和雙手，在超凈工作臺(tái)的____________旁將錐形瓶中的LB培養(yǎng)基分裝到一系列試管中，并做標(biāo)記。

(2)當(dāng)試管溫度下降到40 ℃(培養(yǎng)基還是液態(tài))時(shí)，用滅菌過的移液器吸取0.1 mL的各類微生物懸液加到相應(yīng)試管中并封口，雙手快速搓動(dòng)試管，使菌種__________于培養(yǎng)基內(nèi)后迅速將封口的試管放置在________條件下使培養(yǎng)基凝固。

(3)將上述試管放置于常溫條件下培養(yǎng)48小時(shí)后觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下圖中表示果酒制作菌種的圖是________。

(二)下圖為培育抗病轉(zhuǎn)基因植物操作過程，請(qǐng)回答下列問題：

(1)抗病基因與載體結(jié)合常用__________________________________處理，獲得的重組載體通過____________方法導(dǎo)入________形原生質(zhì)體中。

(2)圖中①表示________，培養(yǎng)過程中需保持________，防止雜菌污染，愈傷組織需適當(dāng)配比的____________和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)。

(3)抗病轉(zhuǎn)基因植物獲得的原理是_____________________________________。

Answer 1

【答案】 15 達(dá)到規(guī)定壓力 酒精棉 酒精燈火焰 均勻分布 低溫 B 相同的限制酶和DNA連接酶 顯微注射 球 脫分化 無菌 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 基因重組和植物細(xì)胞全能性

【解析】試題分析：無菌技術(shù)操作原則：
（1）操作前準(zhǔn)備：
①操作環(huán)境應(yīng)清潔、寬敞、定期消毒；物品布局合理；無菌操作前半小時(shí)應(yīng)停止清掃工作、減少走動(dòng)、避免塵土飛揚(yáng)。
②工作人員應(yīng)做好個(gè)人準(zhǔn)備，戴好帽子、口罩，修剪指甲并洗手，必要時(shí)穿無菌衣、帶無菌手套。
（2）操作中保持無菌
①工作人員應(yīng)面向無菌區(qū)，手臂應(yīng)保持在腰部或操作臺(tái)臺(tái)面以上，不可跨越無菌區(qū)避免面對(duì)無菌區(qū)談笑、咳嗽、打噴嚏。
②用無菌持物鑷取用物品；無菌物品一經(jīng)取出，即使未用，也不可放回?zé)o菌容器內(nèi)；一套無菌物品僅供一位患者使用，避免交叉感染。 ③無菌操作中，無菌物品疑有污染或已被污染，應(yīng)予更換并重新滅菌。
（3）無菌物品保管：
①無菌物品必須與非無菌物品分開放置。
②無菌物品不可暴露于空氣中，應(yīng)存放于無菌包或無菌容器中，無菌包外須標(biāo)明物品名稱、滅菌日期，并按失效期先后順序排放。
③定期檢查無菌物品的滅菌日期及保存情況。無菌包在未被污染的情況下保存期一般為7天，過期或受潮應(yīng)重新滅菌。

(一)（1）微生物培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法，即在在121℃條件下滅菌15min，滅菌時(shí)間從滅菌鍋內(nèi)壓力達(dá)到規(guī)定值時(shí)開始。為了防止雜菌污染，培養(yǎng)基滅菌后，倒試管之前，操作者的手和桌面都需要用酒精擦拭，而且倒試管的過程必須在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行。

（2）本實(shí)驗(yàn)的目的是研究氧對(duì)微生物的影響，所以需要將微生物均勻分布于試管的培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)基凝固需要在較低溫度下進(jìn)行。

（3）果酒制作菌種是酵母菌，是一種兼性厭氧性微生物，有氧呼吸時(shí)繁殖快，無氧呼吸時(shí)繁殖慢，面較多，下面較少，故選B。

(二)（1）基因工程中，常用相同的限制酶切割抗病基因與載體，然后用DNA連接酶將兩者連接起來，構(gòu)建為重組質(zhì)粒，再通過顯微注射方法導(dǎo)入球形原生質(zhì)體中。

（2）圖中①表示脫分化過程，培養(yǎng)過程中需保持無菌狀態(tài)，以防止雜菌污染導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。愈傷組織需適當(dāng)配比的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)。

（3）抗病轉(zhuǎn)基因植物獲得的過程中運(yùn)用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，原理分別是基因重組和植物細(xì)胞的全能性。