Question

天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用．研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精．請(qǐng)回答下列問題：

（1）將淀粉酶基因切割下來(lái)所用的工具是 ，用 將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，此表達(dá)載體除目的基因外，必須含有 、 和標(biāo)記基因．

（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測(cè)方法 ，該項(xiàng)方法要用 作探針進(jìn)行檢測(cè)；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用 方法檢測(cè)．

（3）采用PCR技術(shù)可對(duì)目的基因進(jìn)行體外擴(kuò)增．該反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水、4種dNTP、模板DNA、引物和 ．其中引物有 種，實(shí)質(zhì)是 ，假如引物都用3H標(biāo)記，從理論上計(jì)算循環(huán)4次，所得DNA分子中含有3H標(biāo)記的占 ．

（4）已知BarnHⅠ與BglⅡ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如圖所示，用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有數(shù)個(gè)BarnHⅠ和BglⅡ識(shí)別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，若干循環(huán)后 序列明顯增多．

Answer 1