Question

14．組織型纖溶酶原激活劑（tPA）在人體纖溶和凝血的平衡調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用，如圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)組織型纖溶酶原激活劑（tPA）的圖解，據(jù)圖回答下列問題：
（1）過程①在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，應(yīng)將tPA基因首端與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件結(jié)合，③過程常用的方法是顯微注射法．
（2）要獲得單個(gè)成纖維細(xì)胞，過程②需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理奶牛胎兒皮膚組織塊．在單個(gè)組織細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，為了防止雜菌污染，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．
（3）成功進(jìn)入成纖維細(xì)胞的tPA基因，最終在轉(zhuǎn)基因牛C中維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化，④涉及到的生物技術(shù)為細(xì)胞核移植技術(shù)，得到的轉(zhuǎn)基因牛C稱之為轉(zhuǎn)基因克隆動物．
（4）從A到B過程中所用的胚胎工程技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)．從個(gè)體水平上看，若轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑，則可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功．

Answer 1

分析 分析題圖：②是動物細(xì)胞培養(yǎng)過程，需要先用胰蛋白酶將細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞；①是目的基因（血清白蛋白基因）；③表示采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將目的基因（血清白蛋白基因）導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程；④是細(xì)胞核移植；⑤為早期胚胎的培養(yǎng)；⑥表示胚胎移植過程．

解答 解：（1）過程①為構(gòu)建的基因表達(dá)載體過程，應(yīng)將tPA基因首端與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件結(jié)合形成重組DNA，③過程為導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程，常用的方法是顯微注射法．
（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理動物組織，以獲得單個(gè)細(xì)胞．故要獲得單個(gè)成纖維細(xì)胞，過程②需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理奶牛胎兒皮膚組織塊．在單個(gè)組織細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，為了防止雜菌污染，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．
（3）成功進(jìn)入成纖維細(xì)胞的tPA基因，最終在轉(zhuǎn)基因牛C中維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化，④為克隆過程，涉及到的生物技術(shù)為細(xì)胞核移植技術(shù)，得到的轉(zhuǎn)基因牛C稱之為轉(zhuǎn)基因克隆動物．
（4）從A到B過程中所用的胚胎工程技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)．若轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑，則說明轉(zhuǎn)基因已經(jīng)表達(dá)，可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功．
故答案為：
（1）乳腺蛋白    顯微注射法
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶    抗生素
（3）轉(zhuǎn)化    細(xì)胞核移植技術(shù)
（4）早期胚胎培養(yǎng)   轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑

點(diǎn)評 本題結(jié)合乳腺生物反應(yīng)器的制備過程圖，綜合考查基因工程、動物體細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割等技術(shù)，要求考生識記基因工程的操作步驟及應(yīng)用，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程；識記胚胎移植的過程．