【題目】牛奶含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、微量元素等物質(zhì)頗受人們的喜歡。但有些人喝牛奶后，不能完全消化其中的乳糖。若將乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M中，便可在乳腺中產(chǎn)生不含乳糖或乳糖含量很低，而其他營養(yǎng)成分又不受影響的牛奶。請(qǐng)回答下列問題：

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要獲取僅在________細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因的啟動(dòng)子，然后還要采用________技術(shù)檢測(cè)奶牛的基因組上是否插入了目的基因。

（2）將重組的表達(dá)載體導(dǎo)入奶牛受精卵常用的方法是________。受精卵體外培養(yǎng)所需的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________等物質(zhì)。

（3）通過________技術(shù)能獲得多個(gè)胚胎從而獲得多個(gè)轉(zhuǎn)乳糖酶基因奶牛。為了獲得母牛，通常選用囊胚中的________細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，請(qǐng)例舉一項(xiàng)性別鑒定的方法________。

【答案】奶牛乳腺 DNA 分子雜交 顯微注射法 血清（或血漿） 胚胎分割 滋養(yǎng)層 檢測(cè)性染色體形態(tài)（或與性別有關(guān)的基因、或巴氏小體檢測(cè)）

【解析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、性別鑒定的方法：

（1）取囊胚中滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，這樣不會(huì)破壞胚胎。

（2）用SRY特異性探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，若形成雜交帶，則說明其含有SRY基因（位于Y染色體上性別決定基因），則胚胎的性別為雄性。

（1）根據(jù)題意可知，將乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M中，便可在乳腺中產(chǎn)生不含乳糖或乳糖含量很低，而其他營養(yǎng)成分又不受影響的牛奶，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要獲取僅在奶牛乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因的啟動(dòng)子，要檢測(cè)奶牛的基因組上是否插入了目的基因，可以采用DNA分子雜交技術(shù)，即利用目的基因作為探針與從奶牛細(xì)胞中提取的DNA進(jìn)行雜交。

（2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法。受精卵體外培養(yǎng)所需的培養(yǎng)液成分一般包括：一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物質(zhì)。

（3）利用胚胎分割技術(shù)可以獲取多個(gè)基因型相同的胚胎。根據(jù)以上分析可知，對(duì)早期胚胎進(jìn)行性別鑒定可以采用囊胚中的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行，這樣不會(huì)破壞胚胎。除外根據(jù)性染色體的形態(tài)和大小不同，性別鑒定還可以采用檢測(cè)性染色體形態(tài)的方法，或者用SRY特異性探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，觀察是否形成雜交帶進(jìn)行。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】科學(xué)家研究表明，新冠病毒是蛋白質(zhì)包裹的單鏈RNA病毒，通過刺突蛋白（S蛋白）與人的ACE2受體識(shí)別結(jié)合，來感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)回答下列問題：

（1）獲取病毒RNA后，采用___________法得到cDNA，再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增S蛋白基因，擴(kuò)增前要根據(jù)一段目的基因的核苷酸序列合成引物，PCR中需要引物的原因是___________________。

（2）科學(xué)家利用S蛋白刺激實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，獲取___________，用于新冠病毒的檢測(cè)及篩查。

（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，首先要檢測(cè)________，這是目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。檢測(cè)的方法是DNA分子雜交技術(shù)，即在含有目的基因的片段上用____________等做標(biāo)記，以此作為探針來檢測(cè)。

（4）用熒光探針檢測(cè)目的基因時(shí)，先將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中_________斷裂，形成單鏈。隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基依據(jù)___________________，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子。兩條姐妹染色單體中最多可有________________條熒光標(biāo)記的DNA片段。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】幽門螺旋桿菌（Hp）是一種寄生在人體胃中的致病細(xì)菌。13C尿素呼氣檢測(cè)Hp的原理是： Hp有的脲酶(一種蛋白質(zhì))能把尿素分解為 NH3 和 CO2，受試者口服13C標(biāo)記的尿素后被脲酶分解生成NH3和13CO2，定時(shí)收集受檢者服藥前后呼氣樣本進(jìn)行對(duì)比，可快速、準(zhǔn)確鑒定是否被感染及感染程度。以下相關(guān)敘述正確的是（ ）

A.幽門螺旋桿菌的遺傳物質(zhì)可能是 DNA 也可能是 RNA

B.幽門螺旋桿菌具有以磷脂雙分子層為基本支架的細(xì)胞膜

C.脲酶合成需要核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器參與

D.感染者呼出的 13CO2由細(xì)胞呼吸過程產(chǎn)生

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】乳酸脫氫酶是糖代謝的重要酶系，可催化丙酮酸與乳酸之間的還原與氧化反應(yīng)。下列有關(guān)說法正確的是（ ）

A.需氧型生物的細(xì)胞中不存在乳酸脫氫酶

B.乳酸脫氫酶分布在乳酸菌的線粒體內(nèi)膜上

C.乳酸能在乳酸脫氫酶的催化下被還原成丙酮酸

D.乳酸脫氫酶催化的部分反應(yīng)是可逆的

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】互花米草在潮間帶濕地生境中具有超強(qiáng)的繁殖和擴(kuò)散能力，科學(xué)工作者為修復(fù)被 破壞的生態(tài)系統(tǒng)，進(jìn)行了人工引入互花米草的“種青引鳥”生態(tài)工程實(shí)驗(yàn)。但隨著互花米 草的定居和大面積擴(kuò)散，威脅到濕地生境中的“土著”物種，同時(shí)還影響灘涂生態(tài)系統(tǒng)的 結(jié)構(gòu)和功能。

（1）互花米草入侵的前期，種群數(shù)量將呈“J”型增長，原因是_____ 。

（2）在與當(dāng)?shù)刂参锔?jìng)爭(zhēng)的過程中，互花米草成為優(yōu)勢(shì)種的原因是_____。當(dāng)?shù)刂参锖屠ハx的種類、分布發(fā)生變化會(huì)導(dǎo)致土著鳥類的分布發(fā)生變化，原因是_____ 。

（3）互花米草的引入事與愿違，這給人們帶來的啟示是_____。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】回答下列有關(guān)物質(zhì)提取的問題。

（1）用蒸餾法提取芳香油的提取量主要取決于___________，由于植物芳香油易揮發(fā)，因此提取植物芳香油時(shí)應(yīng)選擇___________的植物材料。

（2）壓榨法提取植物芳香油時(shí)，可用___________法除去果膠、果蠟，以提高出油率。

（3）提取胡蘿卜素常用的方法是___________，所用溶劑應(yīng)具有___________的特點(diǎn)。

（4）血紅蛋白的提取和分離一般可以分為四步：___________、粗分離、純化和___________。通過_____法進(jìn)行純化而第四步采用___________法完成。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】雌雄異株的某二倍體植物有紅色花、粉色花和白色花3個(gè)品系。研究發(fā)現(xiàn)植株的性別及花色由3對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因控制，其中植株的性別由A/a控制，花色則由D/d與E/e共同控制（DE個(gè)體開紅色花，ddee個(gè)體開白色花，其余開粉色花）�；卮鹣铝袉栴}。

（l）這3對(duì)等位基因共同遵循的遺傳定律有____和____。

（2）取某植株的花藥進(jìn)行單倍體育種，得到了雄株和雌株，說明控制雄性的基因是____（填“A”或“a”）。

（3）用紅色花和粉色花的雄株分別與白色花雌株雜交，獲得的子代植株雌雄比例均為1：1，且只開白色花。研究者分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果后作出了“雌配子活性均正常，但雄配子只要含D或E則無活性”的假設(shè)。若該假設(shè)成立，實(shí)驗(yàn)所用紅色花雄株的基因型為____ ，實(shí)驗(yàn)所用粉色花雄株產(chǎn)生的有活性的花粉的基因型為____，該粉色花雄株與一株紅色花雌株（花色基因型與實(shí)驗(yàn)所用紅色花雄株一致）雜交，后代中粉色花雌株所占的比例是____。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】我國是世界古茶樹保存面積最大、數(shù)量最多的地方。近年來古茶價(jià)格飛漲，過度采摘的情況嚴(yán)重；另外人們對(duì)純生態(tài)茶存在誤解，認(rèn)為茶樹不可人為干預(yù)，茶農(nóng)既不施用有機(jī)肥，也不進(jìn)行生物防治，使古茶樹損傷嚴(yán)重。茶葉的初加工全部采用傳統(tǒng)的薪柴作為能源，森林受到嚴(yán)重?fù)p害，使當(dāng)?shù)貏?dòng)、植物以及微生物數(shù)量大量減少，古茶園局部小氣候轉(zhuǎn)變引起古茶樹病、蟲害發(fā)生率增加；同時(shí)薪柴燃燒產(chǎn)生的煙塵、二氧化硫、氮氧化物對(duì)周圍環(huán)境產(chǎn)生了不良影響�；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題。

（1）針對(duì)古茶樹種群嚴(yán)重受損的情況，現(xiàn)對(duì)其進(jìn)行種群水平的研究，集中于對(duì)__________的研究，其中雌雄同株的古茶樹種群不具有的特征是__________。群落是更高層次的系統(tǒng)，在群落水平上研究的是種群間的關(guān)系、__________（答出兩點(diǎn)）。

（2）根據(jù)題中信息，請(qǐng)?zhí)岢霰Ｗo(hù)古茶樹的一些可行性舉措：____________________。欲探究采取保護(hù)措施前后土壤微生物的數(shù)量變化情況，請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)思路及最可能的預(yù)期結(jié)果（微生物數(shù)量越多，對(duì)淀粉的分解速率越快，請(qǐng)以碘液作為檢驗(yàn)試劑設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)）。

實(shí)驗(yàn)思路：________________________________________。

最可能的預(yù)期結(jié)果：________________________________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】靈芝多糖具有抗腫瘤、抗氧化、抗突變、抗衰老、降血糖等多種生物活性�？蒲腥藛T欲探究靈芝多糖對(duì)不同菌種的抑菌效果，請(qǐng)回答以下相關(guān)問題

（1）實(shí)驗(yàn)中需配制___________培養(yǎng)基培養(yǎng)枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌，還需配制______培養(yǎng)基培養(yǎng)指狀青霉、黑曲霉、黑根霉（填“MS”、“馬鈴薯瓊脂”或“牛肉膏蛋白陳”）。

（2）對(duì)供試菌的處理：先將（1）中6種供試菌活化培養(yǎng)然后利用顯微鏡結(jié)合___________（工具）對(duì)它們計(jì)數(shù)，最后用___________稀釋，使6種供試菌濃度相同。

（3）采用紙片瓊脂法檢測(cè)抑菌效果：將浸有___________的濾紙片，3片間隔一定距離貼在含菌平板上，并用______________________作為對(duì)照組。每種菌重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次，目的是___________。在相同且適宜溫度下培養(yǎng)，測(cè)量抑菌圈的直徑。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：比較各組抑菌圈直徑大小，若抑菌直徑越大表明______________________。

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