【題目】胰島素分泌主要受血糖水平調節(jié),也受胰島a細胞分泌物等其他因素影響.胰島素瘤細胞(簡稱INS﹣1細胞),具備分裂和分泌胰島素能力.為探究不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液對INS﹣1分裂和分泌胰島素的影響,請根據(jù)所給的實驗材料完成如下實驗.

實驗材料:INS﹣1細胞、含不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液(0%、10%、30%、100%)的培養(yǎng)液、20mmol/L的葡萄糖溶液,顯微鏡,培養(yǎng)瓶,胰蛋白酶,血細胞計數(shù)板等.(要求與說明:胰島素含量測定及細胞計數(shù)的具體操作不作要求;培養(yǎng)過程中不更換 培養(yǎng)液;培養(yǎng)液成分變化不利于細胞生長不作要求;實驗條件適宜)

請回答:

(1)實驗思路:_______

(2)設計一份實驗結果記錄表._________

【答案】①取INS﹣1細胞,經(jīng)胰蛋白酶處理后得到細胞懸浮液,在顯微鏡下用細胞計數(shù)板進行計數(shù),并記錄.②取培養(yǎng)瓶若干個,平均分成4組并編號,分別加入等量的INS﹣1細胞、等量的不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液和等量且適量的20mmol/L的葡萄糖溶液.每組設置重復樣品若干.③將上述四組樣品培養(yǎng)一段時間后,分別取上述四組中的培養(yǎng)瓶內的細胞懸浮液,在顯微鏡下用學細胞計數(shù)板分別進行計數(shù),計算平均值并記錄;收集上清液,測定胰島素含量,計算平均值并記錄.④對實驗數(shù)據(jù)進行分析與處理

溶液

胰島素含量(mg/100ml)

細胞數(shù)(個)

樣品1

樣品2

樣品3

平均值

樣品1

樣品2

樣品3

平均值

0%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

10%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

30%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

100%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

【解析】

實驗思路和結果分析都要牢牢把握實驗目的,該實驗的目的是探究不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液對INS-1分裂和分泌胰島素的影響,所以要配置不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液,一般設定4組不同比例即可,其他一切因素要保證相同。

(1)實驗思路:

總體先梳理思路:該實驗的目的是探究不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液對INS-1分裂和分泌胰島素的影響,所以要配置不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液,一般設定4組不同比例即可,其他一切因素要保證相同。

具體步驟:首先取INS-1細胞,經(jīng)胰蛋白酶處理后得到細胞懸浮液,在顯微鏡下用細胞計數(shù)板進行計數(shù),并記錄。然后分組培養(yǎng)時,平均分成4組并編號,分別加入等量的INS-1細胞、等量的不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液和等量且適量的20 mmol/L的葡萄糖溶液。每組設置重復樣品若干(設置為3個)。培養(yǎng)一段時間后,分別取上述四組中的培養(yǎng)瓶內的細胞懸浮液,在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板分別進行計數(shù),計算平均值并記錄;收集上清液,測定胰島素含量,計算平均值并記錄。最后對實驗數(shù)據(jù)進行分析與處理。

(2)由于該實驗的目的是探究不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液對INS-1分裂和分泌胰島素的影響,因此實驗結果記錄表應包含:不同比例的胰島a細胞培養(yǎng)上清液共4組,每組3個平行,及其所對應的實驗結果:胰島素含量(mg/100ml)和細胞數(shù)(個),據(jù)此設計下表:

溶液

胰島素含量(mg/100ml)

細胞數(shù)(個)

樣品1

樣品2

樣品3

平均值

樣品1

樣品2

樣品3

平均值

0%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

10%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

30%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

100%的胰島a細胞培養(yǎng)上清液

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(1)完善實驗思路:

①取培養(yǎng)瓶若干,均分成4組,標號為1、2、3、4。分別加入__________________和人肺癌細胞懸液。

②2-4號培養(yǎng)瓶中分別加入_______________________,l號培養(yǎng)瓶加入_______________。置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間。

③對4組培養(yǎng)瓶中的細胞進行計數(shù)。

④對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計與處理。

(2)預測實驗結果(設計一張表格用于填寫實驗數(shù)據(jù),并預測實驗結果): _______________

(3)分析與討論

①如何計算細胞的存活率?________________________。

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