Question

【題目】如圖是純化纖維素分解菌并生產(chǎn)乙醇的基本工作流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

（1）圖中①過(guò)程選取富含纖維素的土壤，在鑒定和篩選所需微生物時(shí)需用____________對(duì)纖維素進(jìn)行染色并制成選擇培養(yǎng)基。最后還要在平板培養(yǎng)基上分離純化目的菌。為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，接種時(shí)要在________旁操作。

（2）圖中②環(huán)節(jié)獲得的酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，分別為C1酶、CX酶和________。前兩種酶使纖維素分解成________，第三種酶將其進(jìn)一步分解成葡萄糖。⑤環(huán)節(jié)常用的菌種是________。

（3）用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中纖維素分解菌數(shù)量。在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，取0.2ml稀釋液涂布，得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果；涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是210、240和246；請(qǐng)計(jì)算每毫升原液中的菌體數(shù)是________。用這種方法測(cè)得的菌體數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)量________。

Answer 1

【答案】剛果紅酒精燈火焰旁葡萄糖苷酶纖維二糖酵母菌1.16×109 少

【解析】

題圖中表示利用纖維素分解菌提取纖維素酶，并利用這種酶分解纖維素以得到葡萄糖，最后利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵的過(guò)程。在鑒定和篩選這種細(xì)菌時(shí)，選擇富含纖維素的土壤較易獲得目的菌種，同時(shí)需要用到選擇培養(yǎng)基，如剛果紅能和纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物，目的菌種能在含剛果紅的選擇培養(yǎng)基中形成透明圈，從而達(dá)到篩選目的。分析題圖：①表示纖維素分解菌的篩選，②表示纖維素酶的活性鑒定，③表示纖維素發(fā)酵，④表示接種酵母菌，⑤表示無(wú)氧發(fā)酵產(chǎn)生乙醇。

（1）分析圖解可知，圖中①過(guò)程表示纖維素分解菌的篩選，因此選取產(chǎn)酶微生物時(shí)應(yīng)選擇富含纖維素的土壤，在鑒定和篩選這種微生物時(shí)需用剛果紅對(duì)纖維素進(jìn)行染色并制成選擇培養(yǎng)基。最后還要在平板培養(yǎng)基上分離純化目的菌。為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，接種時(shí)要在酒精燈火焰旁旁操作。

（2）從目的菌種中得到的纖維素酶一般認(rèn)為至少包括三種組分別為C酶、C酶和葡萄糖苷酶。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。⑤過(guò)程表示無(wú)氧發(fā)酵產(chǎn)生乙醇的過(guò)程，此過(guò)程需要用酵母菌作為菌種。

（3））涂布的三個(gè)平板的菌落的平均值為（210+240+246）/3=232個(gè)。每毫升原液中的菌體數(shù)是232/0.2×106=1.16×109個(gè)，由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，看到的是一個(gè)菌落，因此用這種方法測(cè)得的菌體數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)量少。