Question

【題目】研究發(fā)現(xiàn)，許多癌細(xì)胞表面會出現(xiàn)高親和力的促性腺激素釋放激素（LHRH）受體。某研究所構(gòu)建了一種導(dǎo)向治療癌癥的藥物——重組人促性腺激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白（LHRH-PE40），目前已完成臨床前研究。

（1）促性腺激素釋放激素（LHRH）由_______分泌，與相關(guān)垂體細(xì)胞膜表面的特異性__________結(jié)合并調(diào)節(jié)其細(xì)胞分泌促性腺激素，進(jìn)而調(diào)節(jié)相關(guān)腺體的激素分泌，該過程體現(xiàn)了激素分泌的___________調(diào)節(jié)。

（2）綠膿桿菌外毒素A(PEA)是綠膿桿菌的主要毒力因子，它必須在進(jìn)入細(xì)胞后才發(fā)揮毒性作用，殺死細(xì)胞。PEA有PEA受體結(jié)合區(qū)、越膜區(qū)和毒性區(qū)三個(gè)功能區(qū)。LHRH-PE40是利用基因工程的方法將LHRH基因和去除_____________區(qū)的所對應(yīng)的基因片段在體外重組后，導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)生的。

（3）為了研究LHRH-PE40與人結(jié)腸癌細(xì)胞膜蛋白特異性結(jié)合的最適加入量�？蒲腥藛T用125I標(biāo)記的LHRH-PE40和人結(jié)腸癌細(xì)胞膜蛋白進(jìn)行結(jié)合實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如下圖所示。

注：—▲—TB：125I-LHRH-PE40與癌細(xì)胞膜蛋白的總結(jié)合量

—■—NB：125I-LHRH-PE40與癌細(xì)胞膜蛋白的非特異性結(jié)合量（非特異性結(jié)合是指激素結(jié)合到受體蛋白除特異性結(jié)合位點(diǎn)之外的其它部位）。

據(jù)圖分析可知125I _LHRH-PE40可作為其與人結(jié)腸癌細(xì)胞膜蛋白特異性結(jié)合的最適加入量是______萬CPM，作出此判斷的依據(jù)是____________________。

（4）為了進(jìn)一步驗(yàn)證：“LHRH-PE40特異性結(jié)合的對象為LHRH受體”，科研人員以人結(jié)腸癌細(xì)胞膜蛋白作為實(shí)驗(yàn)材料，并先后添加相關(guān)藥品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（注：藥品A-D均溶于E）

A.125I-LHRH B.LHRH-PE40 C.LHRH D. LHRH受體 E.緩沖液

分組	先加藥品	后加藥品	測量指標(biāo)
實(shí)驗(yàn)組	藥品1	藥品3	檢測膜蛋白與藥物結(jié)合后的放射性
對照組1	E
對照組2	藥品2

①藥品1、2、3分別是_______（填字母）。

②若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為__________，則證明“LHRH-PE40特異性結(jié)合的對象為LHRH受體”的說法正確。

③若將LHRH-PE40作為治療結(jié)腸癌的臨床藥物，需要補(bǔ)充的數(shù)據(jù)是______。

Answer 1

【答案】下丘腦 受體 分級調(diào)節(jié) PEA受體結(jié)合區(qū) 80 特異性結(jié)合量較低，且和總結(jié)合量差值最大（加入量最少） B C A 實(shí)驗(yàn)組的放射性和對照組2大致相同，且明顯低于對照組1 藥物是否保留了PEA毒性的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對人體的臨床實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)，藥物對其它正常細(xì)胞尤其是垂體細(xì)胞是否有毒害作用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，藥物是否會引發(fā)體液免疫或過敏的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，藥物在機(jī)體是否會被降解，降解速率的相關(guān)研究數(shù)據(jù)等。

【解析】

1、性激素的分級反饋調(diào)節(jié)：下丘腦通過釋放促性腺激素釋放激素，來促進(jìn)垂體合成和分泌促性腺激素，促性腺激素則可以促進(jìn)性腺的活動(dòng)，合成和釋放性激素，當(dāng)性激素達(dá)到一定濃度后，這個(gè)信息又會反饋給下丘腦和垂體，從而抑制兩者的活動(dòng)，這樣性激素就可以維持在相對穩(wěn)定水平。

2、分析圖示可知：當(dāng)放射性標(biāo)記物加入量較低時(shí)，總結(jié)合量與非特異性結(jié)合量差值不大，在放射性標(biāo)記物加入量為80萬CPM時(shí)，能保證在加入量最少的情況下，總結(jié)合量與非特異性結(jié)合量差值最大，且隨著放射性標(biāo)記物加入量增大時(shí)，總結(jié)合量與非特異性結(jié)合量差值變化不大。

（1）促性腺激素釋放激素由下丘腦合成分泌，通過血液運(yùn)輸，與垂體細(xì)胞膜表面的特異性受體結(jié)合并調(diào)節(jié)其細(xì)胞分泌促性腺激素，進(jìn)而調(diào)節(jié)相關(guān)腺體的激素分泌，該過程體現(xiàn)了激素分泌的分級調(diào)節(jié)。

（2）綠膿桿菌外毒素A(PEA)是綠膿桿菌的主要毒力因子，它必須在進(jìn)入細(xì)胞后才發(fā)揮毒性作用，殺死細(xì)胞，為了防止綠膿桿菌外毒素A(PEA)進(jìn)入受體細(xì)胞并發(fā)揮毒性作用導(dǎo)致受體細(xì)胞死亡，我們可去除PEA受體結(jié)合區(qū)，故LHRH-PE40是利用基因工程的方法，將LHRH基因和去除PEA受體結(jié)合區(qū)的所對應(yīng)的基因片段在體外重組后，導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)生的。

（3）據(jù)圖可知，在放射性標(biāo)記物加入量為80萬CPM時(shí)，能保證在加入量最少的情況下，總結(jié)合量與非特異性結(jié)合量差值最大，故125I-LHRH-PE40可作為其與人結(jié)腸癌細(xì)胞膜蛋白特異性結(jié)合的最適加入量是80萬CPM。

（4）①該實(shí)驗(yàn)的目的時(shí)進(jìn)一步驗(yàn)證“LHRH-PE40特異性結(jié)合的對象為LHRH受體”，故實(shí)驗(yàn)組中應(yīng)加入藥品LHRH-PE40，對照組2中加入等量的LHRH，對照組1可加等量的溶劑E，然后三組都加入相同的125I-LHRH，故藥品1、2、3分別是LHRH-PE40、LHRH、125I-LHRH，即B、C、A。

②若LHRH-PE40特異性結(jié)合的對象與LHRH結(jié)合的對象一樣為LHRH受體，則實(shí)驗(yàn)組和對照組2中的腸癌細(xì)胞膜蛋白與125I-LHRH結(jié)合的將減少，所以若實(shí)驗(yàn)組的放射性和對照組2大致相同，且明顯低于對照組1，則證明LHRH-PE40特異性結(jié)合的對象為LHRH受體。

③若將LHRH-PE40作為治療結(jié)腸癌的臨床藥物，還需要補(bǔ)充藥物是否保留了PEA毒性的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對人體的臨床實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)，藥物對其它正常細(xì)胞尤其是垂體細(xì)胞是否有毒害作用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，藥物是否會引發(fā)體液免疫或過敏的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，藥物在機(jī)體是否會被降解，降解速率的相關(guān)研究數(shù)據(jù)等。