Question

9．根據(jù)基因工程的有關知識，回答下列問題：
（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有黏性末端和平末端．
（2）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，一類是從大腸桿菌分離得到的，稱為E•coliDNA連接酶，另一類是從T₄噬菌體分離得到的，稱為T4DNA連接酶，這兩類酶的作用是恢復限制酶切開的磷酸二酯鍵．
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．若受體細胞是大腸桿菌，通常用Ca²⁺處理細胞，使細胞處于感受態(tài)，易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子．
（4）目的基因?qū)�入動物細胞采用最多的方法是顯微注射法．動物基因工程可以提高動物的生長速率是由于外源生長激素基因在受體動物體內(nèi)的表達：若用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物，科學家通常將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，最終培育的轉(zhuǎn)基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物，因而稱為乳腺生物反應器．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生兩種類型的末端，即黏性末端和平末端．
（2）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，一類是從大腸桿菌分離得到的，稱為E•coliDNA連接酶，另一類是從T₄噬菌體分離得到的，稱為T4DNA連接酶，這兩類酶的作用是恢復限制酶切開的磷酸二酯鍵．
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．將目的基因?qū)�入微生物細胞常用感受態(tài)細胞法，即用Ca²⁺處理微生物細胞，使細胞處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．
（4）將目的基因?qū)�入動物細胞采用最多的方法是顯微注射法．動物基因工程可以提高動物的生長速率是由于外源生長激素基因在受體動物體內(nèi)的表達．若用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物，科學家通常將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，最終培育的轉(zhuǎn)基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物，因而稱為乳腺生物反應器．
故答案為：
（1）黏性末端    平末端 
（2）大腸桿菌   T₄噬菌體    磷酸二酯鍵
（3）轉(zhuǎn)化   Ca²⁺
（4）顯微注射法    生長激素   乳腺生物反應器

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．