Question

紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病．目前臨床使用的是重組人紅細(xì)胞生成素（rhEPO），其簡(jiǎn)易生產(chǎn)流程如圖．請(qǐng)回答：
（1）圖中①所指的物質(zhì)是

 

，②所指的物質(zhì)是

 

．
（2）基因表達(dá)載體導(dǎo)入中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系（CHO）最常采用的方法是

 

，它的啟動(dòng)子是

 

的識(shí)別和結(jié)合部位．
（3）CHO是倉(cāng)鼠的卵巢細(xì)胞經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的

 

培養(yǎng)獲得的無(wú)限增殖細(xì)胞．重組CHO細(xì)胞培養(yǎng)需要

 

的環(huán)境，及營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH和氣體環(huán)境適宜的條件．
（4）檢測(cè)rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體．單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是

 

，并可大量制備，它是由小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與其特定B淋巴細(xì)胞通過(guò)

 

技術(shù)獲得的雜交瘤細(xì)胞分泌的．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用,動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程,單克隆抗體的制備過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：解答本題首先讀懂人紅細(xì)胞生成素生產(chǎn)流程圖．圖中可以看出，該過(guò)程利用了基因工程的方法，其目的基因是通過(guò)人工合成中的反轉(zhuǎn)錄法合成的，即從人胚胎干細(xì)胞中提取的mRNA，由該mRNA為模板合成DNA的過(guò)程．啟動(dòng)子是位于結(jié)構(gòu)基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確的結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性．
此外，還需理解幾個(gè)概念：
原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞．初次培養(yǎng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)．
傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱(chēng)為傳代培養(yǎng)．
細(xì)胞株：原代培養(yǎng)細(xì)胞傳至10代左右就不容易傳下去，細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞能存活傳到40～50代，這部分細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株．
細(xì)胞系：細(xì)胞株傳到50左右不能再繼續(xù)傳代，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無(wú)限制的傳代下去，這部分細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞系．

解答： 解：（1）逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程是指由RNA為模板合成DNA的過(guò)程，因此圖中①是指從人胚胎干細(xì)胞中提取的mRNA．此過(guò)程的目的基因?yàn)榧t細(xì)胞生成素（EPO）基因，因此基因工程的產(chǎn)物應(yīng)為人紅細(xì)胞生成素（rhEPO）．
（2）目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常采用顯微注射法．啟動(dòng)子是位于結(jié)構(gòu)基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確的結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性．
（3）無(wú)限增殖細(xì)胞是細(xì)胞培養(yǎng)到50代后具有癌變特性的細(xì)胞系，因此必須通過(guò)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)獲得．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，及營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH和氣體環(huán)境適宜的條件．
（4）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)有：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備，它是由小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與其特定B淋巴細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)獲得的雜交瘤細(xì)胞分泌的．
故答案為：
（1）mRNA    rhEPO
（2）顯微注射技術(shù)    RNA聚合酶
（3）原代培養(yǎng)和傳代    無(wú)菌、無(wú)毒
（4）特異性強(qiáng)、靈敏度高         動(dòng)物細(xì)胞融合

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體等方面的知識(shí)，意在考查考生識(shí)記和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．