Question

科學家將外源目的基因與大腸桿菌的質粒進行重組，并在大腸桿菌中成功表達。下圖表示構建重組質粒和篩選含目的基因的大腸桿菌的過程。請據圖回答：

（1）步驟①和②中常用的工具酶是                       。

（2）經過①和②步驟后，有些質粒上的       基因內插入了外源目的基因，形成重組質粒。

（3）步驟③是                  的過程。為了促進該過程，應該用       處理大腸桿菌。

（4）步驟④：將三角瓶內的大腸桿菌接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基C上培養(yǎng)，目的是篩選                                        。能在C中生長的大腸桿菌有       種。

（5）步驟⑤:用無菌牙簽挑取C上的單個菌落，分別接種到D（含氨芐青霉素和四環(huán)素）和E（含四環(huán)素）兩個培養(yǎng)基的相同位置上，一段時間后，菌落的生長狀況如圖所示。含目的基因的菌落位于（選填“D”或“E”）       上，請在圖中相應的位置上圈出來。

Answer 1

（1）限制性內切酶、DNA連接酶       （2）氨芐青霉素抗性     

（3）將重組質粒（目的基因）導入大腸桿菌（受體細胞） CaCl2溶液

（4）含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌（含抗性基因的大腸桿菌給分，但回答含目的基因的大腸桿菌不給分） 2 （5）E    （圈兩個菌落）