Question

以下是有關(guān)DNA粗提取實驗的材料：

A．核酸極不穩(wěn)定，在較為劇烈的化學(xué)、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制備

DNA時要加入DNA酶的抑制劑——檸檬酸鈉，以除去Mg，防止DNA酶的激活。

B．核酸中的DNA和RNA在生物體內(nèi)均以核蛋白的形式存在，DNA核蛋白在1 mol/L

NaCl溶液中溶解度很大，但在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度很低；而RNA核

蛋白溶于0.14 mol/L NaCl溶液。

C．用苯酚處理，可使蛋白質(zhì)變性，且留在苯酚層內(nèi)；在DNA溶液中加入2.5倍體積、

濃度為95%的酒精，可將DNA分離出來；此時DNA十分黏稠，可用玻璃棒攪成

團取出。

D．DNA在強酸環(huán)境下，水解產(chǎn)生脫氧核糖等小分子物質(zhì)，它與二苯胺酸性溶液反應(yīng)，

能生成藍色化合物。

E．實驗材料與器械：檸檬酸鈉溶液、石英砂、0.14 mol/L NaCl溶液、1 mol/L NaCl

溶液、蒸餾水、苯酚、95%酒精、二苯胺試劑、濃硫酸、花椰菜、研缽、燒杯、

漏斗、玻璃棒、量筒、石棉網(wǎng)、酒精燈、吸管、試管等。

F．實驗步驟：研磨的勻漿→過濾的濾液→濾液稀釋6倍→離心處理的沉淀物→沉淀物

再溶解→加苯酚靜置后去上清液→提取出DNA→DNA鑒定。

 

據(jù)以上材料回答下列問題：

(1)研磨時，取10 g花椰菜，加入適量的石英砂、________和________。

(2)將濾液稀釋6倍，其目的是__________________________________________。

(3)取沉淀物，置于2 mL 1 mol/L NaCl溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加入2 mL

苯酚充分震蕩后靜置，待其分層后棄其上層的苯酚。該步驟的目的是除去________。

(4)如何將剩余溶液中的DNA提取出來？

(5)如何證明提取物是DNA分子？

 

Answer 1

(1)1 mol/L NaCl溶液　檸檬酸鈉　(2)使DNA核蛋白的溶解度逐漸降低　(3)蛋

白質(zhì)　(4)向下層DNA溶液中加入2.5倍體積、濃度為95%的酒精，此時用玻璃棒攪動，

在玻璃棒上的成團物即是DNA。

(5)用適量的濃硫酸處理提取物，再滴加二苯胺試劑數(shù)滴，如有藍色物質(zhì)出現(xiàn)即可證明

提取物是DNA。