Question

【題目】關(guān)于DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)材料的選擇，研究者經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)效果的比較，最終選擇雞血做實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：

（1）在實(shí)驗(yàn)中，兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是 （_________）

A．稀釋血液，沖洗樣品

B．使血細(xì)胞破裂、降低NaCl濃度使DNA析出

C．使血細(xì)胞破裂、增大DNA溶解量

D．使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的DNA。

（2）生活在牧區(qū)的人們，采集牛、羊和馬血比較方便，若它們按實(shí)驗(yàn)要求完成實(shí)驗(yàn)步驟后，結(jié)果是很難提取到DNA，原因是______________________________。

（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液濃度是______________時(shí)，DNA的溶解度最小。

（4）DNA的析出和鑒定時(shí)，析出DNA時(shí)應(yīng)將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的____________（寫出體積分?jǐn)?shù)），靜置后溶液中將析出DNA。鑒定時(shí)所用的試劑為____________。

（5）電泳利用了待分離樣品中各種分子的_____________________________等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺中的遷移速度完全取決于_________________________________。

Answer 1

【答案】B 牛羊馬為哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核 0．14mol/l 95%的酒精 二苯胺 帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀 分子的大小

【解析】

DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性．（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

DNA粗提取和鑒定的過(guò)程：（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大；（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液；（3）去除濾液中的雜質(zhì)：方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi)；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離；（4）DNA的析出與鑒定：①將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)。

（1）實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水，第一次的目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出DNA，第二次目的是稀釋 NaCl溶液，使DNA從溶液中析出，故選B。

（2）牛羊馬為哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，因此若它們按實(shí)驗(yàn)要求完成實(shí)驗(yàn)步驟后，結(jié)果是很難提取到DNA。

（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液濃度是0.14mol/l時(shí)，DNA的溶解度最小。

（4）DNA的析出和鑒定時(shí)，析出DNA時(shí)應(yīng)將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的95%的酒精，靜置后溶液中將析出DNA。鑒定時(shí)所用的試劑為二苯胺。

（5）電泳的原理是不同分子的帶電性質(zhì)的差異和分子本身的大小、形狀不同，導(dǎo)致帶電分子產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺中的遷移速度完全取決于分子的大小。