Question

【題目】高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：

（1）過程①②合稱為_______________________。按功能分，Ⅰ號培養(yǎng)基稱為_____________；該培養(yǎng)基中必須以________作為唯一碳源。 Ⅱ號培養(yǎng)基的接種方法為_______________________。

（2）對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，目的是__________________________________。

（3）在1號培養(yǎng)基上挑出能產(chǎn)生淀粉酶的嗜熱菌菌落的鑒別方法是培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_______________；也可將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖所示情況，可判斷圖中______________的菌落含有所需菌種。

（4）如果高溫淀粉酶的產(chǎn)業(yè)化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復(fù)使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，則應(yīng)選擇下圖中的_______（填寫字母）固定化工藝。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法 選擇培養(yǎng)基 淀粉 平板劃線法 使培養(yǎng)基中所有微生物永遠喪失生長繁殖能力（殺死培養(yǎng)基中所有微生物，包括芽孢和孢子） 透明圈 周圍不顯藍色 C

【解析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落．高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設(shè)備，一般壓力在100KPa，溫度在121℃的條件下，維持15～30分鐘用于培養(yǎng)基的滅菌；用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法；火焰灼燒可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針等。

（1）據(jù)圖分析，從液體菌種到固體平板的過程及菌落生長均勻分析，過程①②為稀釋涂布平板法。按功能分，Ⅰ號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，需要使用以淀粉為唯一的碳源。Ⅱ號培養(yǎng)基的接種方法是平板劃線法。
（2）為防止雜菌污染，對配制的培養(yǎng)基采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
（3）根據(jù)題意可知，Ⅰ號培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的透明圈可以鑒別嗜熱菌菌落。淀粉與碘液反應(yīng)呈藍色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，則會出現(xiàn)無色的透明圈，故圖乙所示情況中無藍色透明圈的菌落含有所需菌種。
（4）如果高溫淀粉酶的產(chǎn)業(yè)化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復(fù)使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，則應(yīng)選擇包埋法的固定工藝，即圖3中的C。