Question

白細(xì)胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細(xì)胞介素的基因?qū)�入到酵母�?xì)胞中，使其分泌出有活性人白細(xì)胞介素。

  

（1）在體液免疫過程中，白細(xì)胞介素是由＿＿＿細(xì)胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B細(xì)胞，使B細(xì)胞增殖，分化、形成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿細(xì)胞。

   （2）目的基因獲�。簭慕】等梭w外周靜脈血分離得到淋巴細(xì)胞，于37°C培養(yǎng)48h，提取細(xì)胞總RNA，生成eDNA。根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通過PCR擴(kuò)增獲取目的基因，此時需要加入的反應(yīng)物與生成eDNA時所加反應(yīng)物不同的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。

   （3）重組載體的構(gòu)建：用兩種限制酶EcoR1與EcoR52處理載體和目的基因后，用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶處理，形成重組載體。該載體與細(xì)胞膜上載體的化學(xué)本質(zhì)分別是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。

   （4）將重組載體導(dǎo)入酵母細(xì)胞，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，收集菌液離心取＿＿＿＿＿＿（上清液/菌體）進(jìn)行產(chǎn)物鑒定。若要統(tǒng)計培養(yǎng)液中酵母菌的活菌數(shù)目，常用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

   （5）利用純化的產(chǎn)物進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實驗，可研究人白細(xì)胞介素對于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 的作用。

Answer 1

（每空2分，共18分）

   （1）T；漿細(xì)胞和記憶；

   （2）模板eDNA、耐高溫（熱穩(wěn)定）DNA聚合酶（Taq酶）、引物；

   （3）DNA連接；DNA；蛋白質(zhì)；

   （4）上清液；稀釋涂布平板法；

   （5）促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖（抑制腫瘤細(xì)胞增殖）。

解析:

(1)為識記內(nèi)容�？疾楫a(chǎn)生淋巴因子的細(xì)胞名稱及B細(xì)胞分化形成的細(xì)胞名稱。

(2)考查PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因所需條件。

(3)注意細(xì)胞膜上的載體和基因工程中的載體是不同的概念，本質(zhì)也不同。

(4)離心后，菌體為沉淀。所以進(jìn)行代謝產(chǎn)物的鑒定需要的是取上清液；微生物的計數(shù)方法有活菌計數(shù)法(稀釋涂布平板法)和顯微鏡直接計數(shù)兩種。

(5)考查白細(xì)胞介素的作用。即淋巴因子的作用，就是促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖。