綠色熒光蛋白基因(GFP)被發(fā)現(xiàn)以來,一直作為一個(gè)監(jiān)測(cè)完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白位的理想標(biāo)記。請(qǐng)根據(jù)圖表回答下列問題。
(1)若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是T↓TCGA,N端伸出的核苷酸的堿基序列是C↑TGCA,則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時(shí),應(yīng)選用限制酶_____,再對(duì)_____進(jìn)行切割。
(2)若對(duì)符合設(shè)計(jì)要求的重級(jí)質(zhì)粒A進(jìn)行酶切,假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開,請(qǐng)根據(jù)圖表中的信息分析,若采用BamH1和Pst1酶切,可得到________種DNA片段。
(3)檢測(cè)GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上,可在熒光顯微鏡下觀察GFP的表達(dá),圖中綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的轉(zhuǎn)基因操作中的GFP既是______也是_____。
(4)綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中涉及到多項(xiàng)現(xiàn)代生物技術(shù),圖中⑤⑥⑦過程屬于_________,而⑨過程屬于____________。
(1)HindIII和PstⅠ    Ti質(zhì)粒
(2)2
(3)目的基因    標(biāo)記基因
(4)核移植   胚胎移植
練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

30.(18分)斑馬魚的酶D由17號(hào)染色體上的D基因編碼。具體純合突變基因(dd)的斑馬魚胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白(G)基因整合到斑馬魚17號(hào)染色體上,

帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)表示為g。用個(gè)體

M和N進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)

(1)在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中,將G基因與質(zhì)粒重組,需要的兩類酶是              。將

重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚           中,整合到染色體上的G基因               后,

使胚胎發(fā)出綠色熒光。

(2)根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)推測(cè)

代M的基因型是            (選填選項(xiàng)前的符號(hào))

a. DDGG      b. DDGg      c. DdGG         d. DdGg

(3)雜交后,出現(xiàn)紅·綠熒光(既有紅色又有綠色熒光)胚胎的原因是親代           (填

“M”或“N”)的初級(jí)精(卵)母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中,同源染色體的           發(fā)生了交換,導(dǎo)致染色體上的基因重組。通過記錄子代中紅·綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù),可計(jì)算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例,算式為            

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科目:高中生物 來源:2010年吉林省吉林市毓文中學(xué)高二下學(xué)期期中考試生物卷 題型:綜合題

(18分)2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)色或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,據(jù)圖回答:
(1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒,需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶I的一個(gè)切點(diǎn),在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶II的切點(diǎn)。
①請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA連接酶作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來____,理由是:________________________________。
(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí),采用最多也是最有效的方法是________。
(3)從分子水平上,檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否插入到豬胎兒成纖維染色體的DNA上,檢測(cè)方法是____________,檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否表達(dá),檢測(cè)方法是____________。
(4)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上,GFP基因可以作為表達(dá)載體上的________。獲得的轉(zhuǎn)基因豬,可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免________________。

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科目:高中生物 來源:2010年廣東省汕頭市金山中學(xué)高二下學(xué)期期中試題生物卷 題型:綜合題

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場(chǎng)自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒,需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。若限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC一,限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC一。在質(zhì)粒上有酶I的一個(gè)切點(diǎn),在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
①請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。
②在DNA連接酶的作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來? _____。理由是_____________________________________。
(2)GFP基因與目的基因一起構(gòu)建到載體上不影響目的基因的表達(dá),也不影響由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能,且對(duì)細(xì)胞無毒性作用,因此GFP基因可以運(yùn)用作為基因表達(dá)載體上的______。
(3)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí),采用最多也最有效的方法是____________。然后還要通過____________技術(shù)來檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上。
(4)為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞,可通過對(duì)母豬注射____________的方法,做超數(shù)排卵處理,并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到____________期即可通過顯微操作將其細(xì)胞核去除。
(5)早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加維生素、激素、__________________等物質(zhì)。
(6)綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程屬于______生殖。目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白,黃色熒光蛋白等,采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是:______(用數(shù)字表示)。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

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科目:高中生物 來源:2014學(xué)年高一生物人教版必修二第6章《從雜交育種到基因工程》練習(xí)卷B(解析版) 題型:綜合題

斑馬魚的酶D17號(hào)染色體上的D基因編碼。具體純合突變基因(dd)的斑馬魚胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白(G)基因整合到斑馬魚17號(hào)染色體上,帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)表示為g。用個(gè)體MN進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)

在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中,將G基因與質(zhì)粒重組,需要的兩類酶是??????? ???????? 。將重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚受精卵中,整合到染色體上的G基因?????????????? 表達(dá)后,使胚胎發(fā)出綠色熒光。

根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)推測(cè):

M的基因型是??????????? (選填選項(xiàng)前的符號(hào))

a. DDGG???????? b. DDgg??????? c. Ddgg?????? d. DdGg

雜交后,出現(xiàn)紅·綠熒光(既有紅色又有綠色熒光)胚胎的原因是親代??????? (填“M”“N”)的初級(jí)精(卵)母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中, 同源染色體的__________發(fā)生了交換,導(dǎo)致染色體上的基因重組。

 

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科目:高中生物 來源:2010年吉林省吉林市高二下學(xué)期期中考試生物卷 題型:綜合題

(18分)2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)色或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,據(jù)圖回答:

 

 

 

 

 

 

 

(1)圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒,需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶I的一個(gè)切點(diǎn),在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶II的切點(diǎn)。

①請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA連接酶作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來____,理由是:________________________________。

(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí),采用最多也是最有效的方法是________。

(3)從分子水平上,檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否插入到豬胎兒成纖維染色體的DNA上,檢測(cè)方法是____________,檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否表達(dá),檢測(cè)方法是____________。

(4)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上,GFP基因可以作為表達(dá)載體上的________。獲得的轉(zhuǎn)基因豬,可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免________________。

 

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