Question

【題目】蘇云金桿菌(Bt)能產生具有殺蟲作用的毒素蛋白。如圖l是4種限制酶及其所識別的序列與酶切位點，圖2是轉Bt毒素蛋白基因棉花的培育過程示意圖，圖2中a和b分別表示抗卡那霉素基因和抗四環(huán)素基因(棉花細胞中不含抗卡那霉素基因和抗四環(huán)素基因)，據(jù)圖回答下列問題：

（1）利用PCR技術擴增目的基因的原理是___________________，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成___________________，用此方法得到的所需目的基因至少要復制_____________次。

（2）基因工程的核心步驟是_________________，假設圖2中質粒原來的BamH I識別位點的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶Bcl I識別位點的堿基序列，現(xiàn)用Bcl I和Hind Ⅲ切割質粒，則目的基因右側還能選擇BamH I進行切割，并獲得所需重組質粒嗎?_________，請說明理由_____________________________________。

（3）抗蟲基因能在棉花細胞中表達，是因為不同生物共用____________ 。導入重組質粒的棉花細胞能在含____________________(填抗生素種類)的培養(yǎng)基上生長。

Answer 1

【答案】 DNA雙鏈復制 引物 3 基因表達載體的構建 可以 切出的粘性末端相同 一套密碼子 四環(huán)素

【解析】【試題分析】

本題考查基因工程的相關知識。解題時首先要正確識圖，并從題目所給的圖形中獲取有效信息，例如要能看出“限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同”的信息，然后根據(jù)各小題的提示內容，梳理相關知識點，對各小題進行分析作答。

（1）利用PCR技術擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制；利用PCR技術擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；根據(jù)DNA分子具有半保留復制的特點，可推知用此方法得到的所需目的基因至少要復制3次。

（2）基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟；據(jù)圖1可知，限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同，所以目的基因右側仍然還能選擇BamH I進行切割，并獲得所需重組質粒。

（3）抗蟲基因能在棉花細胞中表達，是因為不同生物共用一套密碼子；據(jù)圖2可知，Ti質粒和含目的基因的DNA均需用限制酶BamH I和Hind Ⅲ切割，這樣會導致重組質粒上缺失a部分(抗卡那霉素基因)，而只含b部分（抗四環(huán)素基因），因此，導入重組質粒的棉花細胞能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。