Question

18．回答與微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題：
（1）在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的常用凝固劑是瓊脂．若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH，則應(yīng)在滅菌之（填“前”或“后”）調(diào)節(jié)．
（2）為防止外來(lái)雜菌入侵，對(duì)玻璃器皿和金屬用具等可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌．
（3）如圖為平板劃線法接種后的示意圖．在劃線接種的整個(gè)操作過(guò)程中，對(duì)接種環(huán)至少需進(jìn)行6次灼燒滅菌．接種后蓋上皿蓋，將平板倒置放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的目的是避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過(guò)快揮發(fā)．
（4）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，每隔一個(gè)“時(shí)間間隔”統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目．

Answer 1

分析 1、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇�，此外，在接種過(guò)程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過(guò)火焰燃燒來(lái)滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．

解答 解：（1）在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的常用凝固劑是瓊脂．在配置培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌．
（2）為防止外來(lái)雜菌入侵，對(duì)玻璃器皿和金屬用具等可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌．
（3）接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，所以完成步驟④中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，以防止造成污染，因此完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次．接種后蓋上皿蓋，為了避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過(guò)快揮發(fā)，應(yīng)將平板倒置放入恒溫箱中培養(yǎng)．
（4）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，每隔一個(gè)“時(shí)間間隔”統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目．
故答案為：
（1）瓊脂    前
（2）玻璃器皿和金屬用具
（3）6      倒置       避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過(guò)快揮發(fā)
（4）菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離與培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制以及消毒和滅菌等有關(guān)方面的知識(shí)，意在考查學(xué)生對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理、步驟、操作技能的掌握情況．