Question

【題目】應(yīng)用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白具有生產(chǎn)方式簡(jiǎn)單產(chǎn)量大、蛋白能進(jìn)行翻譯后修飾等優(yōu)點(diǎn)，是具有廣闊前景的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)。回答以下相關(guān)問(wèn)題：

（1）科學(xué)家應(yīng)用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白，需將___________與___________等調(diào)控組件重組在一起，通過(guò)______________________等方法，導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的___________中，進(jìn)而獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，再?gòu)霓D(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳汁中獲取藥物蛋白。

（2）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器的鑒定

第一步：DNA水平的檢測(cè)判明是否為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，使用的___________須非常特異，要根據(jù)啟動(dòng)子調(diào)控序列和目的基因序列精心設(shè)計(jì)。

第二步：RNA水平的檢測(cè)目的是鑒定___________情況。

第三步：目的蛋白的檢測(cè)可采用___________技術(shù)，依據(jù)的原理是______________________。

Answer 1

【答案】藥用蛋白基因 乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子 顯微注射 受精卵 探針 目的基因轉(zhuǎn)錄 抗原抗體雜交 抗原與抗體特異性結(jié)合

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白，需要將目的基因（藥用蛋白基因）和乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子結(jié)合，構(gòu)成重組DNA，將重組DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞，通常使用顯微注射法，受體細(xì)胞常用受精卵。

（2）第一步：DNA水平鑒定方法，常用分子雜交技術(shù)，需要設(shè)計(jì)探針；

第二步：RNA水平鑒定是檢測(cè)該目的基因是否轉(zhuǎn)錄。

第三步：檢測(cè)蛋白質(zhì)使用抗原抗體雜交技術(shù)，因?yàn)榭乖�與抗體特異性結(jié)合。